小鼠皮肤切创愈过程中c-jun表达及其与损伤时间相关性的研究.pdf

·中文论著摘要· 小鼠皮肤切创愈合过程中c-jun表达 及其与损伤时间相关性的研究 目 的 皮肤损伤愈合是一个复杂而连续的过程，包括血液成分凝集、炎症、肉芽组 织形成、新生上皮覆盖、结缔组织收缩和纤维化等过程。原癌基因e-jun是即刻早 期基因jtin家族成员之一，属于碱性亮氨酸拉链家族核内转录因子成员，可以结 合在许多基因的启动子上参与基因转录的调控，其表达产物在多种基因表达、细 胞凋亡、增殖、分化等过程中起重要作用。本研究应用免疫组织化学染色和Western blot技术，检Nd,鼠皮肤损伤区在损伤后不同时间段c-jun表达的变化情况，探讨 c-jun在皮肤损伤愈合中的作用及其在损伤时间推断上应用的可能性。 实验材料与方法 健康成年(8周龄)清洁级昆明系小鼠55只，雌雄不限，体质量35—409，随 机分为11组。其中皮肤切创分为10个时间段组，另一组为正常对照组，每组均 为5只小鼠。乙醚气体吸入麻醉，背部剪毛处理后，常规手术消毒，在背部中央 对照组小鼠麻醉后背部剪毛，不做切创，观察至14d，脱颈椎处死，取相同部位 同等大小皮肤，以备HE染色、免疫组织化学染色和Westernblot检测应用。应用 免疫组织化学染色和Western blot技术检测55例小鼠皮肤切创后各时间段c-jun 变化情况，以非切创小鼠皮肤组织作对照，显微镜x400倍下，在损伤区及损伤周 边区随机选取10个视野，计数细胞总数、阳性细胞数及阳性细胞率。应用Fluochem V2．0软件检测各时间段的平均光密度值，测得数据用均数±标准差(i±s)表示。 用SPSSl3．0 结果 正常对照组小鼠皮肤中c-jan主要表达在表皮、毛囊和皮脂腺等处。伤后3h 即可见少数多核粒细胞有c-jan表达。伤后6~24h，大量浸润的多核粒细胞和部分 胞率比较低，随着伤后时问的延长，c-jun阳性细胞率逐渐增加，12h达到高峰。 伤后1～5d一直呈高表达状态。伤后7d时c-jan阳性细胞率达到第二峰，随后逐渐 下降。除伤后ld与3d阳性细胞率差异无统计学意义外(尸O．05)，其它各组与 blot 相邻上组的细胞总数及阳性细胞率差异均有统计学意义(P0．05)。Westem 结果显示正常对照皮肤内有c-jan阳性条带，皮肤切创伤后各时间段组c-jan表达 强度有一定规律。伤后O～12h，表达逐渐增强；12h达高峰。l～5d稍有下降；伤 后7d，c-jun表达稍有上升，随后表达渐降低。但12h组中c-jan表达相对较多， 到14d时，c-jan基本与对照组表达情况一致。除oh与对照组间平均光密度值差 异无统计学意义外(P0．05)，其余各组间平均光密度值差异均具有统计学意义 (P0．05)。 结论 1、正常对照组小鼠皮肤的表皮、毛囊及皮脂腺中表达c-jan。 2、小鼠皮肤切创愈合过程中多核粒细胞、单个核细胞及成纤维细胞均表达 c-jan。 3、小鼠皮肤切创愈合过程中c-jan对诱导多核粒细胞、单个核细胞及成纤维 细胞的凋亡可能起着重要作用。 4、小鼠皮肤切创愈合过程中c-jun表达的规律性变化可用于皮肤切创损伤时 间的推断。 关键词 法医病理学；皮肤损伤；凋亡；c-jan；损伤时间推断 2 ● 英文论著摘要 ● onthe of un A c-j Study Time--dependentExpression IncisedSkin the during ob