小鼠皮肤切创愈过程中ⅱ型大麻素受体(cb2r)表达的研究.pdf

1ItlttiltItlH1tlltl Itlll1 ItlI ＼1 目 录 一、摘要 B·o Q oogqoo000oooloo……l 中文论著摘要…………………………………………·o 英文论著摘要……………………………………………………………………3 二、英文缩略语…………………………………………………………………………5 三、论文 前言………………………………………………………………………………6剖舌…………………………………………………………”…………………。6 实验材料与方法…………………………………………………………………7 实验结果(附论文照片)………………………………………………………10 讨论………………………………………………………………………··……·18 结论………………………………………………………………………………20 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………21 五、参考文献…………………………………………………………………………22 六、附录 综j苤……一…………·……………………………………………………………24 在学期间科研成绩………………………………………………………………35 致谢……·………………………………………………………………………··36 个人简介…………………………………………………………………………37 炎症期、 、细胞因 ，CB2R) 为G蛋白偶联受体，能激活多种信号转导通路，主要分布于外周，如免疫系统和 造血细胞。新近研究发现CB2R与多种不同疾病和组织损伤有关，发挥重要的抗 炎和抗纤维化的作用。本研究应用免疫组织化学染色和Westernblot技术，检测小 鼠皮肤损伤区在损伤后不同时间CB2R表达的变化情况，探讨CB2R在皮肤损伤 愈合中的作用及其在损伤时间推断上应用的可能性。 实验材料与方法 健康成年清洁级昆明系小鼠50只，体质量359-409，随机分为10组，每组 5只，其中1组为正常对照组。乙醚气体吸入麻醉，背部剪毛处理后，常规手术 消毒，在背部中央做一纵行长1．5CIn皮肤全层切口，深达筋膜，分别于伤后Oh，6h, 织，对照组小鼠取相同部位同等大小皮肤，以备HE染色、免疫组织化学染色和 Western blot方法检测50例 blot蛋白印迹技术应用。应用免疫组织化学和Western 小鼠皮肤切创后不同时间CB2R变化情况，以非切创小鼠皮肤组织作对照，显微 镜x400倍下，在损伤区及损伤周边区随机选取10个视野，计数细胞总数、阳性 细胞数及阳性细胞率。应用FluochemV2．0软件测各片段的平均光密度值，测得 forWindows进行单因素方差分 数据用均数4-标准差(2+s)表示。用SPSSl3．0 析，以P0．05为差异有显著性意义。 当日刁写结果 免疫组织化学结果显示，对照组CB2R表达于表皮、毛囊、皮脂腺、皮肌层、 血管平滑肌、神经纤维外膜及神经纤维束束膜；伤后6h切创皮肤损伤区及周边区 多核粒细胞少量表达CB2R，12h．24h以单个核细胞阳性表达为主，3d以单个核细 胞和梭形成纤维细胞表达为主，5d．14d以梭形成纤维细胞为主。CB2R阳性细胞 率于oh一3d逐渐升高，5d达最