小鼠皮肤切创愈过程中mgl表达及分布的研究.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………1 英文论著摘要……………………………………………………………3 二、英文缩略语…………………………………………………………………6 三、论文 ”……”” 前言LDIDO…………00翮吾 0………………………………………………………7…………………“………………“”…“…………。。7 材料与方法………………………………………………………………8 实验结果…………………………………………………………………13 讨论……····…………………………一…………………………………24 结论……………·………………………………………………·………·26 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………27 五、参考文献………．．．………………………………………………………28 六、附录 综述………··……………………………………………………………·30 在学期间科研成绩…………………………………………………………40 致谢………”·………………………·一………………………··………·41 个人简介…………………………………………………………………42 ·中文论著摘要· 小鼠皮肤切创愈合过程中MGI_表达及分布的研究 目的 皮肤损伤愈合是一个连续而又复杂的生理过程，其大致可分为三个阶段：急 性渗出期、纤维增生期和组织重建期。在急性渗出期，各种类型的炎症细胞，例 如中性粒细胞和巨噬细胞，浸润到损伤区域参与清除损伤坏死组织、异物及入侵 的病原体等。在纤维增生期，肌纤维母细胞主要参与损伤组织的修复。许多实验 证实，在皮肤损伤愈合过程中有各种各样的细胞因子、生长因子和趋化因子的参 与。研究表明内源性大麻素系统广泛参与炎症反应。内源性大麻素水解酶主要有 种重要的内源性大麻素水解酶，其主要作用是水解花生四烯酸甘油酯(2．AG)。 有研究证实，MGL在啮齿类动物的脑组织中高度表达，并且在维持内源性大麻素 水平方面起到重要作用。到目前为止，尚未发现有关MGL在皮肤损伤愈合过程 中的研究。本实验首次研究小鼠皮肤切创愈合过程中不同损伤时间段MGL的表 达和分布情况，探讨MGL在皮肤损伤愈合过程中的作用及其应用于损伤时间推 断的可能性。 实验材料与方法 组为皮肤切创组，另1组为对照组。腹腔注射戊巴比妥钠，背部剪毛处理后，常 规手术消毒，在背部中央做一纵行长1．5cm皮肤全层切口，深达筋膜。伤后每只 小鼠单独饲养，防止感染，保持12h的昼夜交替生活节律。分别于伤后6h、12h、 皮肤组织。各组5只小鼠的皮肤样本均分为两部分，一部分用于HE染色和免疫 荧光染色，另一部分用于Westernblot和real．timePCR检测。对照组5只小鼠麻 blot 醉后背部剪毛，不做切创，取相同部位同等大小皮肤。应用免疫荧光，Western 及real．timePCR技术检Nd,鼠皮肤切创后不同时间MGL表达变化情况，以非切 创小鼠皮肤组织作对照，显微镜x400倍下，在损伤区及损伤周边区随机选取10 个视野，计数细胞总数、阳性细胞数及阳性细胞率。应用Scion image软件测各片 for 段的平均光密度值，测得数据用均数±标准差(孑±J)表示。用SPSSl3．0 Windows进行单因素方差分析，以P0．05为差异有统计学意义。 结果 正常小鼠皮肤的表皮、毛囊及皮脂腺均表达MGL。皮肤切创后6--12h，在 皮肤损伤区及其周边区可见大量中性粒细胞表达MGL；伤后1--一5d,MGL阳性细 胞主要以巨噬细胞为主；伤后714d，MGL主要表达在肌纤维母细胞中。MGL 阳性细胞率于5d达高峰。中性粒细胞表达MGL的