泡球蚴永久性保方法及其保存后生物活性的研究
泡球蚴永久性保存方法及其保存后生物活性的研究
中文摘要
目的:观察继发性泡球蚴整鼠经液氮冻存后传代健康小鼠,被接种小鼠体内
泡球蚴的生长情况及其生物活性,以探讨泡球蚴保种传代的新方法。
方法:从继发性泡球蚴小鼠腹腔中取出透亮泡球蚴的包囊组织,先吸出囊液
3ml,包囊用无菌眼科剪剪碎,无菌纱网过滤除去不均匀组织块后与囊液混合,以
青霉素及链霉素溶液混合稀释,使最终形成25%泡球蚴组织混悬液。青霉素浓度
为800U/ml,链霉素浓度为500U/ml。最后加入地塞米松3滴。选取健康小鼠25
只,消毒后腹腔注射O.5ml/只,作为本次研究对照组。另取继发性泡球蚴小鼠处
死后密封并置液氮罐液相中冻存一周后取出,迅速解冻,自小鼠腹腔取出泡球蚴
包囊组织,按前述方法配制悬液并接种健康小鼠20只,作为本次研究试验组。两
组小鼠分别饲养两个月后处死,剖检并从以下方面评价冻存效果:(1)大体观察
及泡球蚴包囊湿重的测量;(2)普通光学显微镜及电子显微镜观察组织学结构及
超微结构;(3)从免疫学方面检测包囊囊液中的蛋白含量及血清中免疫球蛋白的
含量;(4)检测小鼠血清碱性磷酸酶及囊液中钙离子含量等生化指标;(5)免疫
组织化学观察IL.2Rn在泡球蚴组织中的有无及其分布情况。综合以上各
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