猪a组轮状病毒p6基因工程乳酸菌的制备及其免疫效果检测.pdfVIP

猪A组轮状病毒vp6基因工程乳酸菌的 制备及其免疫效果检测 摘要 该项研究分为两个阶段：乳酸菌基因工程疫苗实验室研究阶段和免疫实验动物检测 基因亚克隆至双标记载体pW425et中，构建出可以在大肠杆菌和乳酸杆菌中穿梭表达的 菌E．coliX13中，SDS．PAGE检测，可见约48kD的融合蛋白。Western blotting分析， 表明蛋白具有与猪轮状病毒多克隆抗体的反应原性，重组质粒转化入乳酸杆菌中，SDS 轮状病毒多克隆抗体的反应原性。转化入重组质粒的嗜酸性乳酸杆菌即为免疫用基因工 程乳酸菌。 将购自吉林大学基础部实验动物中心的34周龄BALB／c小鼠分成4组，每组20 只，分别是A组：空对照组；B组：普通嗜酸性乳酸杆菌组；C组：重组基因工程大肠 杆菌组；4组：重组基因工程乳酸杆菌组。小鼠购进之日起，每日定时、定量饲喂溶于 CD8叮淋巴细胞相对数量检测和CD+19B淋巴细胞相对数量的检测。 免疫后机体在免疫水平上的变化如下：体液免疫水平显著提高，表现在血清中抗轮 CD4+／