猪繁殖与呼吸综征病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达.pdfVIP

摘要 搁要 猪繁殖与呼吸综合征(porcine and reproductiverespiratorysyndrome，PRRS)是由猪 繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的急性接触性传染病，1987年首次发生于美国， 随后在世界各地传播。1996年郭宝清等首次报道本国分离到PRRSV病原，目前本病己 成为危害养猪业的主要疾病之一。建立针对该病的快速、有效的检测方法是为我国猪群 PRRSV流行病学调查及猪群免疫的重要基础。 PRRSV ORF7编码病毒的核衣壳蛋白(N)是病毒的主要结构蛋白，免疫原性强且 在型内高度保守。本实验根据PRRSV美洲型代表毒株的基因序列，设计了能够扩增其N 上美洲型代表毒株序列进行了比较，结果表明该基因与美洲型代表毒株序列完全同源。 将此基因亚克隆到DREsTB表达载体中，构建了表达质粒pREST-N。将重组质粒转化入 蛋白大小与预期相符，经Western．Blot免疫印迹分析，该表达产物与兔抗PRRSV高免血 清反应，说明PRRSV核衣壳蛋白基因在原核系统获得有效表达，为进一步建立PRRSV 免疫学诊断提供了重