猪细小病毒vp基因克隆及伪狂犬病毒转移载体的构建.pdf

祠泣d卜学 位 任仑文 山亩月F 东 J匕书1』匕 吮喇 摘要 猪细小病毒 (PPV)与伪狂犬病毒 (PrV)是引起猪繁殖障碍的两个主要病原。PPV 和PrV引起的疾病在我国有很高的感染率和发病率，给我国的养猪业造成了巨大的经济 损失。传统的常规疫苗对防制PPV和PrV的感染有一定的效果，但是存在不可避免的缺 陷，为了更好的控制PPV和PrV感染.，研制更加安全有效的PPV-PrV二价基因工程疫 苗是解决这一问题的最好途径。 本实验分离得到了一株PPV新毒株，从病原学、血清学、分子生物学等几个方面对 其进行了鉴定，将其命名为SY-99株然后提取该病毒DNA，以之为模板，利用PCR技术 扩增其主要免疫原性基因即VP2基因，将VP2基因克隆到从酵母表达载体即icz “-$ 上，为研制PPV重组亚单位疫苗打下了基础。 通过序列分析，表明PPVVP2基因由1740个碱基组成，编码580个氨基酸。利用 DNAsis、GeneDoc分析软件分析 SY-99株VP2基因序列，并分别比较 SY-99株与 NADL-2(4973)株、NADL-2(5075)株、Kresse株、US-