用pcr法快速量人类粪便中双歧杆菌的研究.pdfVIP

用PCR法快速定量人类粪便中双歧杆菌的研究 硕士研究生：于静 指导教师：唐立 教授 专业名称：病原生物学 摘 要 目的：人类肠道拥有大量活跃、复杂的菌群，其中约占正常成人 肠道菌群3％，婴儿肠道菌群75％．91％的双歧杆菌是一种重要的维持肠 道微生态平衡的生理菌，具有预防腹泻与肠道感染、缓解便秘、免疫 调节的作用，【“2】快速准确定量人类粪便中的双歧杆菌对于分析肠道复 杂菌群的结构，配合临床检验指导临床用药，保持肠道菌群动态平衡， 维持健康预防疾病具有重要意义。目前国内外对于肠道中双歧杆菌的 定量采用的对粪便标本进行稀释滴种法分离计数，费时费力；在提取 DNA基础上建立的普通PCR法只能定性和半定量，【3JDNA提取步骤 繁琐且DNA提取中用到的酚、蛋白酶K等试剂易抑制PCR扩增，[4】 影响双歧杆菌的定量。本实验的目的是将粪便离心、洗涤处理后，不 PCR建立快速、准 经过分离培养和DNA提取纯化步骤，用real-time 确从粪便标本中定量双歧杆菌。