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- 2016-03-10 发布于贵州
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组织细胞dna解与死亡时间的相关性研究
组织细胞DNA降解与死亡时间的相关性研究
组织细胞DNA降解与死亡时间相关性的研究
中文摘要
目的摸索运用末端转移法、原位末端标记法及琼脂糖电泳法研究机体死后不同
时间段DNA的降解程度及规律,探讨该规律在推断死亡时间方面的可行性,为
实际工作中推断死亡时间提供一个科学的依据。
方法取SD大白鼠,颈椎错位处死,置于室温20℃的环境下,在死后不同时间
检材为肝、肾、脾,按照取材死后时间段的不同分为12组。课题共分三个部分。
第一部分:运用末端转移法检测DNA降解:剪碎组织,酚氯仿提取组织DNA;
紫外可见分光光度计在260rim、280rim波长处检测DNA提取液的吸光度值,获
DNA,加入5uTdT酶、5nmol
得DNA的纯度和浓度;每个死亡时间段均取lug
dUTP,在37℃水浴中相互反应1h;用无水乙醇和乙酸铵共沉淀DNA,保留液
体:紫外可见分光光魔计在260rim波长处检测液体中反应剩余的dUTP的吸光
疫。第二部努: 运瑟骚经寒游标记法检溅DNA降瓣:缓织麓10%中瞧多聚翠
醛固定{常规脱水、透明、石蜡包埋,切片
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