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  • 2016-03-10 发布于贵州
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组织细胞dna解与死亡时间的相关性研究

组织细胞DNA降解与死亡时间的相关性研究 组织细胞DNA降解与死亡时间相关性的研究 中文摘要 目的摸索运用末端转移法、原位末端标记法及琼脂糖电泳法研究机体死后不同 时间段DNA的降解程度及规律,探讨该规律在推断死亡时间方面的可行性,为 实际工作中推断死亡时间提供一个科学的依据。 方法取SD大白鼠,颈椎错位处死,置于室温20℃的环境下,在死后不同时间 检材为肝、肾、脾,按照取材死后时间段的不同分为12组。课题共分三个部分。 第一部分:运用末端转移法检测DNA降解:剪碎组织,酚氯仿提取组织DNA; 紫外可见分光光度计在260rim、280rim波长处检测DNA提取液的吸光度值,获 DNA,加入5uTdT酶、5nmol 得DNA的纯度和浓度;每个死亡时间段均取lug dUTP,在37℃水浴中相互反应1h;用无水乙醇和乙酸铵共沉淀DNA,保留液 体:紫外可见分光光魔计在260rim波长处检测液体中反应剩余的dUTP的吸光 疫。第二部努: 运瑟骚经寒游标记法检溅DNA降瓣:缓织麓10%中瞧多聚翠 醛固定{常规脱水、透明、石蜡包埋,切片

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