羊膜上皮细胞和膜间充质干细胞构建组织工程皮肤的实验研究.pdf

羊膜上皮细胞和羊膜间充质干细胞构建组织工程皮肤的实验研究 中文摘要 中文摘要 目 的：1.从人足月胎盘羊膜中分离羊膜间充质干细胞和羊膜上皮细胞，建立 相应培养体系，体外共培养两种细胞探究两者二维共培养中的相互影响关系。2. 分析鉴定羊膜间充质干细胞（human amniotic mesenchymal stem cells, hAMSC ）和 羊膜上皮细胞(human amnion epithelial cells, hAEC) 的干细胞特性以及羊膜上皮细 胞作为组织工程皮肤表层种子细胞与人皮肤角质形成细胞的相似性。3.通过三维气 液培养以羊膜上皮细胞和羊膜间充质干细胞构建组织工程皮肤。 方 法：取人足月剖宫产胎儿胎盘机械剖离羊膜，通过胰酶、胶原酶分步消化 分离培养人羊膜间充质干细胞（hAMSC ）、羊膜上皮细胞（hAEC) ，通过流式细胞 分析术鉴定两种细胞CD90 等表型情况，通过RT-PCR 检测基因 CMYC 等的表达 情况以鉴定 hAMSC 与 hAEC 在基因表达水平的干细胞特性，同时 RT-PCR 检测 hAEC 、hKRT19 等基因的表达，免疫荧光