杉木的遗传转化究.pdfVIP

摘要 lanceolata Hook．)为我国特产，分布于长江流域以南各省区，是南 杉木(Cunninghamia 方重要的速生用材针叶树种之一。近几十年，杉木病害日趋严重——本研究开展杉木转抗 病基因实验的目的与意义即在于此。 本实验在已经取得杉木组培快繁系统的基础上，以杉木试管苗的茎段为外植体，进行 了一系列有关杉木转基因的研究：遗传转化受体系统的建立，转基因瞬时表达研究与稳定 表达研究。 通过改变预培养时间、蔗糖浓度、6．BA、TDZ、头孢霉素、卡那霉素浓度，探讨该 因素对茎段再生不定芽的影响，最终建立了以茎段为外植体的高频再生系统。研究发现， DCR+6-BA 1．0mg／L+TDZ0．001mg／L+NAAO．1mg／L+蔗糖209／L培养基对杉木茎段芽的诱 导最有效，预培养2d时，芽诱导频率、平均芽数和芽形成能力最高，分别为100％、6．35 和6．35。在之后的转化实验中皆采用该培养基进行茎段的芽诱导。 利用GUS基因的酶学特性，进行瞬时表达研究，目的是在短期内优化转化条件。通过 改变预培养时间、共培养时间、AS浓度、pH值、侵