红笛鲷lck和dt基因的克隆及表达分析.pdfVIP

II ] 红笛鲷lck 和tdt 基因的克隆及表达分析 摘 要 鱼类T 淋巴细胞酪氨酸激酶（Lymphocyte cell kinase ，LCK ）和末端脱氧核糖核 酸转移酶 （Terminal deoxynucleotidyl transferase ，TdT ）均是效应T 细胞形成的必要 因子，在T 细胞介导的免疫应答中具有重要作用，对其编码基因在细菌诱导下的表达 模式进行研究，有助于揭示鱼类抗菌免疫的分子机制。本研究通过同源克隆和RACE 技术获得红笛鲷（Lutjanus sanguineus ）lck 和tdt 基因序列全长，并利用免疫组织化 学技术及原位杂交技术对其定位进行验证分析。结果如下： 1. lck 和tdt 基因全长的获得及序列分析：基因克隆获得lck 基因cDNA 序列全长 为2279 bp ，完整开放阅读框（open reading frame，ORF ）为1506 bp，编码501 个氨 基酸。预测分子量（MW ）为57.4 kDa，理论等电点（pI ）为4.98 。tdt 基因cDNA 序 列全长为1710 bp，ORF 为1392 bp，编码463 个氨基酸。预测MW 为52.6 kDa ，理 论pI