青海血蜱cdn表达文库的构建和“隐藏抗原”基因的筛选、克隆与表达.pdf

青海血蜱cDNA表达文库的构建和“隐藏抗原”基因的 筛选、克隆与表达 摘要 qinghaiensis)及其传播的血液原虫病严重威胁着我国畜牧业的发 青海血蜱(Haemaphysalis 展。目前对蜱的防治主要以药物防治为主。但随着蜱耐药性的产生以及环境污染雨I药物残留等严 重公共甲生问题的出现迫使人们寻求防治的新途径。在众多控制蜱的方法中，免疫学防制是前景 最诱人的方法。本研究采用两种不同的免疫途径制备了羊抗青海血蜱唾液腺蛋向阳性血清和羊抗 青海血蜱唾液蛋白阳性血清。应用WesternBlot方法，将上述两种血清分别与青海血蜱唾液腺蛋 白提取物杂交以进行蛋白的差异显示。结果表明羊抗青海血蜱唾液腺蛋白阳性血清能识别青海血 蜱唾液腺更多的蛋白带。这些差异蛋白的分子量分别为49kDa、35 过制各性电泳，将所发现的差异条带切取回收并免疫家兔，获得兔抗青海血蜱蔫异蛋白阳性血清。 以、|饱血青海由蜱的唾液腺、马氏管和卵巢等器官为材料，构建青海血蜱的eDNA表达文库，库 容昔约为2×1060 pfuhnl。利用兔抗青海血蜱差异蛋向阳性血清对青海血蜱cDNA表达文库进行免 大肠杆菌