loc6627变异剪接体2对3t3-l1前脂肪细胞成脂变化和增殖凋亡的影响.pdfVIP

摘 要 第一部分 U．2基因生物信息学分析及细胞定位 【目的1初步了解LI．2基因及蛋白的结构、功能和亚细胞定位，研究LI．2基因及蛋 白在小鼠各组织分布情况，为后续研究提供基础。 I方法l运用生物信息学方法分析LI．2基因及蛋白的结构和功能，在荧光显微镜下 观察其亚细胞定位。采用半定量RT．PCR检测小鼠各组织LI．2基因mRNA水平， 式报告检测系统的高通量筛选技术筛查与CREB相互作用的调控基因。 基酸，预测分子量为13．2kDa，等电点为7．77；系统发育分析表明，LI．2基因在 多种物种体内高度保守，但与任何已知基因和蛋白质没有明显同源性。保守域分 因在脂肪、骨骼肌、小肠、肺及肾脏组织均有表达，但在脂肪和骨骼肌组织表达 较高；LI．2的亚细胞定位提示，GFP．L12融合蛋白在细胞质中弥漫分布，并在 核周围有一些高度集中点；(3)CREB荧光素酶报告基因检测系统结果提示过表达 LI-2增加了CREB的活性，其活性是空白对照组的2．5倍。 【结论ILF2基因在多种物种体内高度保守，提示了它具有重要的功能。LI-2在白 色脂肪组织高表达，同时基于定量的CREB荧光素酶反式报告检测系统的高通 量功能性筛选平台显示了与CREB转录活性相关的基因中包括LI．2基因。这些