rscs移植联cop-1免疫治疗对青光眼模型鼠rgcs的保护作用.pdf

本课题在医学遗传学国家重点实验室完成 中文摘要 第一章鼠青光眼模型的建立和视网膜干细胞的培养及鉴定 目的：建立鼠慢性青光眼模型，观察各组鼠眼压的变化。培养视 stem 网膜干细胞(retinalcells，RSCs)，鉴定并观察其分化特点。 方法：取正常成年SD大鼠，采用532．二极管激光行270。角膜缘 血管网及三条浅层巩膜静脉光凝，建立鼠慢性青光眼模型。取正常成 年SD大鼠眼球，仔细分离出睫状体边缘区的视网膜组织块(包括色素 组织)，消化成单细胞悬液后置于含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、 表皮生长因子(EGF)、B27的无血清培养液中进行干细胞培养，免疫细 胞化学染色鉴定细胞的表型及分化特征。 结果：成功建立21只大鼠慢性青光眼模型，在激光光凝后14d， 眼压达最高峰，其平均值为31．64-3．2mmHg，对侧对照眼为 验组眼压差异无显著性。培养的RSCs中干细胞标记物神经丝蛋白 (Nestin)表达阳性，细胞增殖标志物5．溴脱氧尿核苷(BrdU)表达阳性。 RSCs分化细胞中神经元标志物神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达阳 性，胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达阳性。 结论：采用532二极管激