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博士论文 Scinderin基因在结直肠癌肝转移中的相关功能研究 Scinderin基因在结直肠癌肝转移中的相关功能研究 摘 要 研究目的： 载体 2．探讨SCIN基因在结直肠癌组织中的表达与肝转移的关系。 3．寻找抗肿瘤治疗的新靶点。 研究方法： 1．利用基因芯片杂交技术筛选结直肠癌肝转移组与无转移组中差异表达的基 因，并用荧光定量PCR技术验证具有显著差异表达的基因。基因芯片和 RT-PCR试验结果均显示SCIN基因是其中较显著差异表达的基因。 框架DNA片断后，两端含酶切位点粘端，可以直接连入酶切后的RNA干扰慢 病毒载体上。将连接好的产物转入制备好的细菌感受态细胞，对长出的克隆 先进行PCR鉴定，在进行测序比对后，鉴定阳性的克隆即为构建成功的SCIN 基因RNA干扰慢病毒载体。 SCIN基因与目的载体分别进行酶切。酶切产物电泳回收后进行定向连接或者 交换，其产物转化细菌感受态细胞。对长出的克隆先进行菌落PCR鉴定，再 对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对分析，比对正确的克隆即为构建成功 的SCIN基因过表达载体构建 4．将各个靶点慢病毒颗