raav9载体导trxr2基因靶向治疗心肌缺血后再灌注损伤的体外研究.pdfVIP

摘要 目的： chain 构建含有肌球蛋白重链增强子(myosinheavy enhance，MHC)的心肌特 brainnatriuretic 异性启动子人脑钠肽启动子(Human peptidepromoter，hBNP) 和人硫氧还蛋白还原酶2基因(Humanthioredoxinreductase2)的腺相关病毒载 体(adeno-associated 分别包装AAV6和AAV9，分别转导293细胞和乳鼠原代心肌细胞，观察其在心 肌细胞上的表达。 方法： 1．pAAV2．1一MHC—hBNP—TR2-Myc质粒的构建： ．BNP启动子，将含有目的基因TXNRD2的质粒进行酶切、PCR扩增及胶回收 进一步的酶切连接后得到重组质粒pAAV2．1-MHC-BNP—TR2一Myc。 2．rAAV-MHC—hBNP．TR2．Myc病毒构建 度和纯度的检测。用DotBlot检测病毒滴度，用十二烷基磺酸纳．聚丙稀酰胺凝 Gel 胶电泳(SDS．PolyacrylamideElectrophoresis