wnt信号通路人骨髓间充质干细胞神经分化作用的研究.pdf

Wnt信号通路对人骨髓间充质千细胞神经分化作用的研究 ． 中文摘要 I目的】 用携带目的基因Wnt．3a及示踪基因册的慢病毒转导人骨髓间充质干细胞 信号通路的体外细胞模型，观察其对址lMSCs神经分化的影响。 【方法】 密度梯度静心加差速贴壁法体外分离和纯化hBMSCs，原代培养2周后传代． 观察细胞形态特征，绘制生长曲线，观察成骨、成脂及成软骨诱导，流式细胞仪 ’ 鉴定其表面抗原。 一 眦S^目GFP，经293FT包装并释放出病毒，将其转导h丑MSCs。 设置转导组、未转导组以及对照组，采用bK、F以及抗氧化剂BHA联合诱导 方案，诱导h丑IMSCs神经分化，倒置相差显微镜下观察细胞形态。R-T．P：(：斟去分 别测定神经诱导前，诱导3h，诱导6h，诱导后维持培养24h不同时点中Wnt-3a、 B蛾岫in、GsK-3 B的mRNA表达水平。免疫荧光细胞化学技术(礤C)观察Wm-3曩 对址IMSCs9《鼬亚细胞分布的影响；测定神经细胞特异