β淀粉样肽刺激胶质细胞诱导海马神经元凋亡的实验研究.pdfVIP

B淀粉样肽刺激小胶质细胞诱导海马神经元凋亡的实验研究 中文摘要 【目的】 AB刺激激活原代培养的小胶质细胞，取小胶质细胞条件培养基作用于原 代培养的海马神经元，观察AB刺激激活小胶质细胞条件培养基对海马神经元的 毒性作用，结合本课题组之前关于小胶质细胞等炎性细胞激活及TNFa在AD发病 中的作用机制的研究，观察TNF-a、IL．ID等细胞因子引起的炎症反应对海马神 经元的损伤，探讨小胶质细胞源性炎性反应在AD发病中的可能作用途径和机 制，为阿尔茨海默病(AD)的抗炎治疗提供一定的理论依据，及能够为AD的预防 和早期治疗提供更有力的细胞学基础。 【方法】 根据本课题组在先前研究中所检测得到Ap卜42对体外小胶质细胞中TNF—a mRNA表达及TNF—a蛋白外分泌量的影响，获得AB肽对小胶质细胞的最佳刺激 方案，用激活后的小胶质细胞条件培养基作用于原代培养的海马神经元，用 western-blot法检测刺激后海马神经元内诱导型一氧化碳合酶和硝基酪氨酸的 表达水平，获得最佳刺激方案，用TUNEL法和DNALadder凝胶电泳法观察海马 神经元的凋亡，同时用激酶活性测定法测定凋亡相关蛋白casepase一3的激活程 度。 【结果】 1．利用“无血清培养法’’进行