三氧化二砷联合体内皮前体细胞移植治疗肺动脉高压的实验研究.pdf

摘要 三氧化二砷联合自体内皮前体细胞移植治疗肺动脉高压的实验研 究 目的探讨应用三氧化二砷联合自体外周血来源的内皮前体细胞(EPC)移植，对 野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压模型的治疗效应及其作用机制。 比较分析肺动脉高压患儿和健康对照儿童外周血内皮前体细胞的数量和功能差 异，探索外周血内皮前体细胞作为判断肺动脉高压病情生物标记物的可能性。 方法抽取SD大鼠股动脉血，应用密度梯度离心法分离外周血中的单个核细胞， 然后进行体外培养。最后将此方法收获的细胞经一系列免疫荧光染色，证实为内皮 前体细胞。抽血同时腹腔注射野百合碱50mg／kg，建立肺动脉高压模型后，对比分 析单独静脉注射体外培养扩增得到的自体内皮前体细胞、腹腔注射三氧化二砷与腹 腔注射三氧化二砷联合细胞移植，对肺动脉高压模型大鼠的治疗效应。干预后3周， 超声心动图测量三尖瓣E／A比值，评价各组动物右室舒张功能；测量右室、肺动脉 压力；处死大鼠，评价组间右室肥大指数(RV／I，v+ⅣS)差异；处理肺组织进行组 织病理学和免疫组化学分析，评价肺动脉中层平滑肌细胞凋亡情况。对照组大鼠则 以同样方法注入生理盐水。 对肺动脉高压患Jh#b周血，以CellQuest软件进行流式细胞分析。在前向角散 射光和侧向角散射光双参数