在胶质瘤干细胞鞘氨醇激酶1对烷化剂敏感性的研究.pdfVIP

摘要 目的 应用诱导培养技术从人胶质瘤细胞系U87中诱导培养胶质瘤干细胞， 分析其生物学活性。研究在胶质瘤干细胞中鞘氨醇激酶与烷化剂敏感性关 系。应用鞘氨醇抑制剂诱导肿瘤干细胞分化增加烷化剂抗肿瘤效果，确定 鞘氨醇激酶为胶质瘤治疗的有效靶点。 方法 通过诱导培养技术从人胶质瘤细胞系U87当中诱导培养胶质瘤干细 胞。利用免疫荧光技术检测胶质瘤干细胞球CDl33和巢蛋白(Nestin)。应 用MTT试验检测胶质瘤干细胞和普通胶质瘤细胞对烷化剂药物尼莫司丁 (ACNU)的敏感性。应用定量PCR技术比较胶质瘤干细胞和普通胶质瘤 细胞的鞘氨醇激酶l基因(SPHKl)表达差异。应用MTT试验和流式细胞仪 检测在胶质瘤干细胞和普通胶质瘤细胞中应用鞘氨醇激酶抑制剂(SKI)增加 肿瘤细胞对烷化剂药物尼莫司丁(ACNU)敏感性。 结果 试验表明应用诱导培养技术可以培养出典型的胶质瘤干细胞球。通过 MTT试验检测其对抗化疗药物的能力明显高于普通胶质瘤细胞。利用免疫 荧光技术检测到在胶质瘤干细胞出现CDl33和Nestin荧光标记。通过定量 PCR胶质瘤干细胞中鞘氨醇激酶l(SPHKl)基因表达明显高于普通胶质 瘤细胞。通过MTT试验和流式细胞仪检测，鞘氨醇激酶抑制剂(sⅪ)能