12细胞工程育种概述.pptVIP

三、幼胚培养与远缘杂交育种 植物胚胎培养（embryo culture) 胚、具胚器官（子方、胚珠）在离体条件下发育成幼苗的技术 2、提高远缘杂种的成苗率 1、克服远缘杂种胚的早期败育现象 胚胎培养的用途 3、使种子无生活力的植株获得后代 4、使胚发育不全的植株获得后代 5、克服种子休眠，提早结实，缩短育种周期 3、在人工控制条件下，可以避免自然灾害的影响 四、种质的长期保存 组织培养技术保存种质资源的优点 1、无性繁殖方式，可以保持种质的稳定性 2、试管保存种质资源可以容纳很高的密度 4、繁殖率高 五、脱毒及繁殖重要品种或材料 1、脱毒 病毒在受侵染的植物中分布不均匀 顶端分生组织不带毒，或浓度极低 　　海棠、一品红、白合、蔷薇、孤挺花、君子兰、红掌、玫瑰、南洋金花等已获得成功。 已广泛应用于花卉生产 2、快速繁殖 　　许多经济植物如水稻、玉米、小麦、马铃薯、高梁、烟草、咖啡、香蕉、人参等生产。 　　一种含有植物胚状体、营养成分、激素以及其他成分的人工胶囊。 六、 人工种子的生产 人工种子（artificial seed） 　　1978年，Muralshige提出利用很少的外植体同步培育出大量的胚状体。将这些胚状体包埋在某种胶囊内使其具有种子的功能，并可直接用于田间播种。 　　我国在胡萝卜、黄连、芹菜、苜蓿等植物中获得大量体细胞胚，人工种子在无菌条件下的萌发率已达90％以上。 　　既能允许内外气体交换畅通，又能防止人工胚乳中水份及各类营养物质的渗漏。此外还应具备一定的机械抗压力。 1、人工种子的构成及特点 （1）人工种子的构成 1）人工种皮 包裹在人工种子最外层的胶质化合物薄膜。 　　一般以生成胚状体的培养基为主要成分，再根据人们的需要外加一定量的植物激素、抗生素、农药以及除草剂等物质，尽可能提供胚状体正常萌发生长所需的条件。 2）人工胚乳 人工配制的保证胚状体生长发育需要的营养物质。 　　由组织培养产生的具有胚芽、胚根，类似天然种子胚的结构，具有萌发长成植株的能力。 3）胚状体 1）生产不受环境因素制约，一年四季可进行生产；　　 （2）人工种子的优点 2）胚状体无性繁育产生，有利于保存种系的优良性状； 3）与试管苗相比，成本更低，更适合于机械化播种； 4）可在人工胚乳中添加营养物、激素、农药、抗生素、除草剂等，以利胚状体的健康生长。 　　通过外植体的固体培养、液体悬浮细胞培养以及花药、花粉的诱导培养都可获得大量的胚状体。 2、人工种子的制备 （1）胚状体的制备及其同步生长 * 　　第十二章 细胞工程育种 植物细胞工程（cell engineering） 以细胞为单位，在体外条件下培养、繁殖或人为地使细胞的某些生物学特性按人们的意愿生产某种物质的过程。 　　植物的每个细胞都具有该物种的全部遗传信息，离体细胞在一定的培养条件下具有发育成完整植株的潜在能力。 细胞所具有的形成各种细胞类型、植株的潜在能力。 植物细胞全能性（cell totipotency） 一、无菌操作技术 所有实验都要求在无菌条件下进行 第一节 植物的细胞和组织培养技术 离体条件 3 4 5 1 2 二、细胞与组织培养过程 1、 预备阶段 （1）配制培养基 植物组织培养的二个密诀：外植体和培养基 1）培养基成份 无机营养物 碳源和能源 维生素 激素 细胞生长素 细胞分裂素 有机物质 2）培养基的配制 能被诱发产生无性增殖系的器官或组织切段。 （2）外植体的选择与除菌 外植体（explant） 双子叶植物常用胚轴和子叶； 单子叶植物常用幼穗、种子、幼胚； 1）外植体的选择 2）除去病原菌及杂菌 HgCl2（升汞）：0.1%，0.5~30分钟。 次氯酸钠：2~10%，10~20分钟。 H2O2（双氧水）：现用得不多。 　　外植体表面除菌后，切成小片（段）插入或贴放培养基上即可。 （3）接种 　　让外植体（器官切段）去分化，使各细胞重新进入旺盛有丝分裂的分生状态。 2、 诱导去分化阶段 　　植物细胞进行异养生长，无需光照。 去分化培养基一般应添加较高浓度的生长素类激素。 　　植物胚、幼龄组织器官比老化组织、器官易去分化产生大量的愈伤组织。 　　原指植物受创伤伤口附近产生的薄壁组织，现已泛指经细胞与组织培养产生的可传代的未分化细胞团。 愈伤组织（callus） 　　愈伤组织经过4-6周的细胞分裂，培养基中的水分及营养成分已基本耗尽，细胞的有害代谢物已在培养基中积累，因此必须进行移植，即继代。 3、 继代增殖阶段 　　通过移植，愈伤组织的细胞数大大扩增，有利于下阶段收获更多的胚状体或小苗。 　　愈伤组织需经过重新分化才能形成胚状体，进而长成小植株。 4、生根成芽（再分化）阶段 胚状体（emb