神经干细胞的分培养及移植治疗大鼠视神经损伤的病理学研究.pdf

摘 要 目的： 1．探讨体外条件下大鼠胚胎源性神经干细胞的分离、培养和传代所需的条件， 为神经干细胞的研究和移植提供依据。 2．建立成功的大鼠视神经损伤模型，并将神经干细胞移植入大鼠损伤的视神经 中，观察其对视神经损伤的修复作用。 方法： 马等脑组织，制成细胞悬液，在配置的无血清培养基(含表皮生长因子、碱性成纤 维生长因子、B27等)中培养。观察不同时期神经干细胞并拍照记录其生长状况， 绘制生长曲线，将所取得的神经干细胞连续传代，并将其诱导分化。采用免疫荧光 方法对原代的神经干细胞和第三代神经干细胞以及诱导分化后的细胞也进行鉴定。 2．所有33只成年Wistar大鼠均为随机选取分组。其中3只为正常视神经组，3 只为急性损伤组，余大鼠随机平均分为干细胞移植组、假移植组和空白对照组三组， 每组大鼠数量相同。所有大鼠均分离出的右眼视神经，用动脉瘤夹在球后约2mm钳 E 夹约15秒钟以损伤视神经，用F—VP(闪光视觉诱发电位)检测以确定视神经 急性损伤模型成功。在视神经损伤后立即用微量注射器将神经干细胞悬液按一定密 Xl O 度(1 6个／m1)缓慢注射入干细胞移植组大鼠视神经的受