拟南芥胼胝质合酶基因GSL8参与细胞壁形成和根端静止中心建立与维持.pdfVIP

植物学报 Chinese Bulletin of Botany 2013, 48 (4): 389–397, doi: 10.3724/SP.J.1259.2013.00389 ·研究报告 · 拟南芥胼胝质合酶基因GSL8参与细胞壁形成和根端静止 中心建立与维持 1* 1 1 1 2 1 1 1 刘林 , 全先庆 , 赵小梅 , 黄力华 , 冯尚彩 , 黄坤艳 , 周晓燕 , 粟文婷 1临沂大学生命科学学院, 临沂 276005; 2 临沂大学现代中药研究所, 临沂 276005 摘要 用T-DNA插入和RNA干扰技术敲除拟南芥(Arabidopsis thaliana)胼胝质合酶基因GSL8, 在光学和透射电子显微镜 下观察野生型和突变体种子的细胞壁和胚根结构, 比较未敲除和敲除该基因幼苗细胞壁及根端分生组织结构。结果表明, 敲除该基因可导致细胞壁发育不良, 壁上出现大小不等的缺口, 缺口处没有质膜将相邻细胞分隔。用T-DNA插入法抑制该 基因表达, 发现在种子发育阶段胚根不能形成正常的静止中心。用小RNA干扰技术抑制该基因表达, 结果显示根端失去静 止中心。综合以上结果, 认为该基因不仅参与细胞壁发育, 也参与根端静止中心的建立与维持。 关键词 拟南芥, 胼胝质合酶基因, 细胞壁, 静止中心, 根 刘林, 全先庆, 赵小梅, 黄力华, 冯尚彩, 黄坤艳, 周晓燕, 粟文婷 (2013). 拟南芥胼胝质合酶基因GSL8参与细胞壁形成 和根端静止中心建立与维持. 植物学报 48, 389–397. 胼胝质是植物细胞合成的β-1,3-键连接的葡聚 有关(Töller et al., 2008; Huang et al., 2009) 。 糖, 在植物生长和发育过程中具有重要作用。胼胝质 GSL8参与雄配子体发育过程中小孢子的有丝分 参与减数分裂(Stone and Clarke, 1992; Samuels et 裂(Töller et al., 2008), 也参与气孔发育(Chen et al., al., 1995; Lucas and Lee, 2004)、有丝分裂和细胞壁 2009) 。根的生长习性与根端分生组织中的静止中心 发 育 (Kakimoto and Shibaoka, 1988, 1992; 关系密切, T-DNA插入突变体的根基本不生长(Chen Samuels et al., 1995; Samuels and Staehelin, et al., 2009), 这是否意味着根端分生组织缺少静止 1996; Rensing et al., 2002)。 中心, 目前尚无报道。因此, 本实验用T-DNA插入法 拟南芥(Arabidopsis thaliana)有12个胼胝质合酶 和小RNA干扰技术抑制GSL8基因表达, 以期揭示该 基因, 亦称为类葡聚糖合酶基因(glucan synthase- 基因在拟南芥生长发育过程中的作用, 旨在阐明其与 like genes, GSL genes), 命名为GSL1─12 (Richm- 根端分生组织静止中心的关系。 ond and Somerville, 2000; Hong et al., 2001; Enns et al., 2005) 。自AGRIKOLA(Arabidopsis Genome 1 材料与方法 RNAi Knock-out Line Analysis)计划实施以来, 这些 基因已有半数得到研究, 研究显示它们参与多种生物 1.1 实验材料和植株培养 学过程。GSL2参与小孢子发生(Dong et al., 2005)和 选取哥伦比亚野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana 花粉管生