下调泛素表达对肺癌细胞放射敏感性的影响及作用机制研究.pdf

II 下调泛素表达对人肺癌细胞放射敏感性的影响及作用机制研究 中文摘要 中文摘要 目的 探讨泛素分子在非小细胞肺癌中的表达，转染抑制泛素基因表达的 shRNA-UBB 、UBC 质粒联合X 射线对人非小细胞肺癌A549 和H1299 细胞生长和 放射敏感性的影响及机制研究，在动物体内验证下调泛素表达的致放射增敏作用。 方法 通过免疫组化法检测泛素在肺癌及癌旁组织中的差异表达，并通过体 内、外实验研究下调泛素对非小细胞肺癌的放射敏感性的影响及其机制：（二）体 外实验：1、设计沉默泛素基因表达的shRNA-UBB 和shRNA-UBC ，用RT-PCR 及 Western blot 法验证shRNA 的沉默效果；2 、MTT 法及克隆形成实验检测转染抑制 泛素基因表达的 shRNA-UBB ，shRNA-UBC ，shRNA-UBB/UBC （联合转染 shRNA-UBB 和shRNA-UBC ）对肺癌A549 和H1299 细胞的增殖及放射敏感性的 影响；3、流式细胞计数法测定下调泛素表达对人肺癌H1299 细胞的凋亡和周期分 布的影响；4 、Wes