小凹蛋白-1在静脉内皮细胞car介导calt;#39;2+gt;内流和no生成中的作用和机制.pdf

中文摘要 目 的:探讨小凹蛋白-1 （Cav-1 ）在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞外钙受体(CaR)介导Ca2+ 内流和 一氧化氮(NO)生成中的作用和机制。 方 法: (1) 用胰酶消化法对HUVECs 原代培养并用形态学及免疫细胞化学法测Ⅷ对其进行鉴定。(2) 取 2-5 代细胞随机分组：细胞外不同浓度钙离子组；CaR 处理组（包括精胺组、精胺+Ca2+ 组、 Calhex231+精胺组、Calhex231+精胺+Ca2+组）；Cav-1 处理组 （包括Filipin+精胺组、Filipin+精胺+Ca2+ 组）；Cav-1ShRNA 处理组（包括 Cav-1shRNA 处理组：Cav-1ShRNA+精胺组、Cav-1ShRNA+精胺 +Ca2+组；空质粒组：Vehicle +精胺+Ca2+组；空白对照(Control)组：未转染+精胺+Ca2+组）。（3 ）利 用转染技术将构建的 Cav-1RNA 干扰质粒(Cav-1ShRNA)转染入 HUVECs 中，使 HUVECs 中的Cav-1 低表达。(4)Rt-PCR 检测 HUVECs 中Cav-1、