细丝蛋白a对人肠癌sw480细胞株体外侵袭能力影响的研究.pdf

目 录 中文摘要……………………………………………………………．1 英文摘要……………………………………………………………4 研究论文细丝蛋白A对人结肠癌SW480细胞株体外侵袭 能力影响的研究 前言……………………………………………………………………………8日lJ舀……………………………………………………………………………芍 材料与方法…………………………………………………．9 结果…………………………………………………………………………．18 附图…………………………………………………………．19 附表……………………………………………………………………22 讨论…………………………………………………………………………．23 结论…………………………………………………………………………．26 参考文献……………………………………………………．．27 综述结直肠癌微转移的最新研究进展……………………30 致{射………………………………………………………………………………．40 个人简历………………………………………………………．．41 中文摘要 细丝蛋白A对人结肠癌SW480细胞株体外侵袭能力影响的研究 摘 要 结直肠癌(colorectal 化道恶性肿瘤，CRC的病死率居癌症病死率的第2位，在全世界范围居第4 位，好发于直肠及直肠与乙状结肠交界处，约占65％，发病大多在40岁以 后，男女比例为2~3：1。以40～50岁年龄组发病率最高。各地资料显示， 随着人们生活水平的提高，饮食结构的改变，其发病率正呈逐年上升趋势 【11。且疗效并不乐观，近年来的结直肠癌5年生存率徘徊在50％一60％【2】；此 外，结肠癌的复发与远处转移是结肠癌患者愈后不良的主要原因。因此， 急待进行与结肠癌相关的基础研究为临床诊断及治疗提供指导。既往研究 表明，细丝蛋白A(FLNa)与乳腺癌、前列腺癌、恶性胶质瘤的发生发展 密切相关【3】，近年来，随着对FLNa研究的不断深入，认为FLNa在结直肠 癌的形成和发展中具有重要作用，有望成为新的检测结直肠腺癌发生、形 成、复发、转移的分子标志物，而且对其抑癌机制的深入研究还可为临床 建立个体化、靶向化治疗结直肠癌提供理论依据。 我们在前期研究中，对60例标本采用免疫组织化学SP法，以人子宫 组织着色作为阳性对照，以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗进行染色作为 阴性对照，结果证明结肠癌组织的FLNa蛋白表达低于正常组，说明FLNa 蛋白可抑制结直肠腺癌的发生，在病理状态下呈低表达，并且FLNa蛋白 其表达水平与结直肠肿瘤的侵袭力呈负相关，对肿瘤的侵袭及转移具有明 显阻遏作用，因此有望成为结直肠肿瘤诊断，治疗、预后的新指标【4】。此 外，我们在前期研究中，通过对60例结肠腺癌患者手术切除的结直肠腺癌 在结直肠腺癌组织中的阳性表达率高于正常结直肠组织，并且在癌组织中 的表达水平与FLNa蛋白表达水平呈负相关，其表达与肿瘤的删分期， 肝转移，淋巴结转移和肠壁浸润深度也具有相关性【5】。本组实验将通过细 胞转染、RT-PCR和Wbstem 移行的影响，并初步探讨其抑癌机制，以期寻找诊断及治疗结直肠癌的新 中文摘要 方法。 为的影响，并初步探讨其抑癌的机制。 方法： l对人结肠癌细胞SW480进行体外培养。 粒作为空载体转染对照组细胞。 3反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和W|estemblot检测3组细胞中FLNa基 因导入：未转染组野生型细胞(SW480)、转染空载体组细胞 (SW480／pcDNA3．1)和转染FLNa 4采用M1vr试验法检测细胞的增殖能力并绘制细胞生长曲线，检测细胞 的存活和生长。 结肠癌SW480细胞侵袭和转移能力。 结果： 稳定表达。 2 高，分别为(1．27士O．03)vs(O．14士O．02)，PO．01。 3 别为(1．18士O．03)vs(O．25士0．02)，PO．05。 4 细胞生长曲线基本重叠，增殖能力无差异。 5划痕损伤实验结果显示：SW480组向划痕处的迁移速度明显快于 显。 6 组穿膜／胶数量无差异(PO．05)。 2FLNa与结肠腺