组织工程化神经体外构建及其修复大鼠坐骨神经缺损的研究.pdf

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组织工程化神经体外构建及其修复大鼠坐骨神经缺损的研究

组织工程化神经的体外构建及其修复大鼠坐骨神经缺损的研究 中文摘要 组织工程化神经的体外构建及其修复大鼠坐骨神经 缺损的研究 中文摘要 第一部分 组织工程化神经的体外构建 目的 采用背根神经节(DRG )神经元、施万细胞与生物材料支架在体外共培养,构 建成一种类似神经组织的组织工程化神经,从而为更好地模拟自体神经移植修复神 经缺损提供新技术。 方法 1. 取新生 1d SD 大鼠坐骨神经,通过反复植块法获取高纯度的施万细胞; 2. 施万细胞注入丝素蛋白神经移植物管腔内,于生物反应器中培养 7 d 后,两端 各植入胚胎 14.5-16.5d SD 大鼠 L4-6 DRGs ; 3. 培养基中培养,建立施万细胞/背根神经节 DRG 共培养体系,体外构建组织 工程化神经; 4. 免疫细胞化学染色观察施万细胞、DRG 与丝素蛋白神经移植物共培养 2w 的 情况; 5. 扫描电镜分别于共培养 2w 、3w 和 4w 后,观察丝管内细胞生长情况; 6. 透射电镜观察共培养 3w 后,丝管内超微结构和髓鞘形成情况。 结果 1.建立了施万细胞/背根神经节 DRG /丝素蛋白神经移植物共培养体系,体外成 功构建组织工程化神经; 2.免疫细胞化学染色观察施万细胞、DRG 与丝素蛋白神经移植物共培养 2w 后, S100 阳性施万细胞与NF 阳性DRG 神经突起沿着丝素纤维,呈条带状纵向

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