生物工程下游技术第二章(动物细胞大规模培养和专用生物反应器)精要.pptVIP

五、中空纤维生物反应器 用途较广，既可用于悬浮细胞的培养，又可用于贴壁细胞的培养。 优点： ●占地空间少； ●细胞产量高，细胞密度可达109数量级； ●生产成本低，且细胞培养维持时间长，适用于长期分泌的细胞。 板框式中空纤维反应器 液营养 中空纤维板 注意几个问题： (一)细胞培养环境 (1)氨离子：细胞培养环境中抑制因素的积聚是提高细胞密度的主要限制因素。 (2)乳酸：高乳酸浓度必将抑制细胞生长 (3)二氧化碳：二氧化碳积聚，对细胞产生毒性作用或者改变细胞代谢水平。 (4)甲基乙二醛(Mc)：对细胞有潜在的损伤作用 (5)渗透压：恒定、适宜 (6)载体：可考虑采用多孔径载体替代容易使细胞受机械搅拌与喷气损伤的常规载体。 (二)细胞死亡与凋亡 大规模细胞培养的后期，维持细胞高的活力是个富有挑战性的课题。最初的研究似乎表明细胞死亡大多由于坏死，而人们逐渐认识到至少是一些细胞系在生物反应器中死亡主要原因是细胞凋亡。 用基因工程方法将bcl—2基因这种细胞凋亡抑制基因导入细胞，bcl—2基因的过量表达能抑制细胞凋亡，提高细胞密度和目的蛋白产量。 大规模动物细胞培养条件下，可通过“细胞静止”过程来降低营养成分消耗和代谢毒物产生。 (三) 培养基与细胞系 动物细胞培养基是细胞赖以生长、增殖的重要因素。天然培养基、合成培养基后，无血清培