硫代葡萄糖苷盐类物质高效液相色谱分析及其结构鉴定的研究.pdf

摘要 硫代葡萄糖苷(简称硫苷)是存在于十字花科蔬菜中一类重要的次生代谢产 物。此类化合物及其降解产物具有广泛的生物活性，不仪可以抑制细菌和微生物 的生长，还具有很好的抗癌活性。因而，对各种硫苷进行分离提纯及其结构鉴定 在食品科学、化学工业、生物医学等方面有着重要的实践意义。高效液相色谱法 作为20世纪70年代发展最快的分离分析技术，现已成为生化、医学、环保、食 品等领域最常用的分析手段，对硫苷类化合物的分离具有很好的效果。本论文主 要是对硫苷的提取分离和结构鉴定方法进行研究，采用离子交换的方法对油菜籽 提取液中的硫代葡萄糖苷类物质进行粗纯化；再用反相高效液相色谱法对其进行 分离分析，并利用制备色谱分离提纯了其中几种硫代葡萄糖苷，应用红外、质谱、 核磁、紫外等手段对其进行结构鉴定；最后应用量子化学计算的方法对硫昔的液 相色谱保留机理进行探讨。 第’章，综述了硫代葡萄糖苷的研究现状，主要包括了硫苷的分布、分类、 形成、降解、生物活性、分析方法等多个方面的内容。 第二章，研究了硫代葡萄糖苷的粗提纯。在硫苷提取液的进一步纯化过程中， 设计了溶剂萃取法、分级析出法和离子交换法等三种方法，结果发现离子交换法 能够将硫苷盐类物质很好地纯化，这主要是因为硫苷主要以硫苷钾盐的形式存在 于油菜籽提取液中，离子交换法对离子型化合物具有很好的选择性。在离子交换 法巾选择三利t离子交换剂进行比较，发现D315大孔阴离子交换树脂对硫苷具有 最好的吸附效果：同时比较氯化钠、硫酸钾、硫酸铵、碳酸氢钠等不同洗脱剂对 硫苷的洗脱效果，发现NaCl的洗脱效果最好，低浓度的NaCI能够将绝大部分 的色素洗脱下来，硫苷则要在高浓度的NaCl条件下才能被洗脱。选取0．02mol／L 的NaCI对色素进行洗脱，0．5mol／L的NaCI对硫苷盐进行洗脱，得到的洗脱液 中主要为硫苷类物质，其他杂质很少，可以直接用于对不同硫苷组分的分离和制 备。 第三章，考察了水一甲醇、水一乙腈一甲醇、水一甲醇一三乙胺一醋酸、水 一甲醇一醋酸铵、水一甲醇一氯化钾等5种流动相分离体系对硫苷分离效果的影 响。其中水一甲醇一三乙胺一醋酸对硫苷盐类物质具有最好的分离效果，并且该 流动相分离体系的溶剂挥发性好，将此流动相分离体系直接用于液相色谱一质谱 联用可以对提取液中的硫苷进行定性分析，解决了在没有标准样品存在条件下硫 苷盐类物质难以定性的问题。水一甲醇一醋酸铵和水一甲醇一氯化钾的分离效果 相似，稍次于水一甲醇一三乙胺一醋酸体系的分离效果，但应用水一甲醇一氯化 钾组成流动相分离体系，以反相制备色谱提纯硫苷，在硫苷收集液中的无机盐容 易除去。应用此方法得到了硫苷盐的提纯物，并应用紫外、红外、核磁、质谱对 其结构进行了鉴定。 第四章，将硫苷与C18烷烃看作一个超分子体系进行研究，应用量子化学的 AMl法，对硫苷在反相高效液相色谱上的保留行为进行探讨，发现硫苷在反相 液相色谱的保留能力不仅仅与超分子体系的总能量有关，而且与硫苷分子的偶极 距、氢键作用和分子结构有关，特别是氢键作用的大小对硫苷的保留时间影响较 大。说明硫苷的液相色谱保留机理不仅与固定相有关，而且与流动相和硫苷分子 结构之间有着密切的关系。 Ⅱ Abstract are natural thatare the Glucosinolates sulfur-containingcompoundsproducedby metabolismofcruciferous and breakdown secondary plants．Itsits’major products the of and andhavealso havebeenfoundtodecrease growthyeastmicroorganisms beenlinkedwithreducedriskof w