erk在内毒素导幼年大鼠脑神经细胞凋亡中的作用.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要………………………………………………………………………l 英文论著摘要……………………………………………………………………”3 二、英文缩略语………………………………………………………………………。5 三、论文 前言…………………………………………………………………………………………………………“60 月U吾…………………………………………………………………………………………………………“ 材料与方法………………………………………………………………………．．6 结果…………………………………………………………………………………………………………“8 讨论…………………………………………………………………………………………………………16 结论…………………………………………………………………………………………………………17 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………18 五、参考文献…………………………………………………………………………·19 六、附录 综述……………………………………………………………………．．．…………………………………20 在学期间科研成绩………………………………………………………………29 致{射…………………………………………………………………………………………………………30 1 个人简介…………………………………………………………………………·3 ·中文论著摘要· ERK在内毒素诱导幼年大鼠脑神经细胞凋亡中的作用 目 的 脓毒症是严重威胁儿童身体健康的一种疾病，发病率和病死率高，感染性脑 损伤严重影响患儿生存期和生存质量，迫切需要寻找有效的防治措施。对内毒素 性脑损伤的研究已经表明，其演变的共同过程是脑水肿，最后发展为不可逆的弥 散性脑灰质神经元变性坏死和白质脱髓鞘。在其演变过程的早期甚至是始动阶段 进行干预将大大减轻脑损伤的程度。 ERK作为细胞周期的重要调节者，是一个作用非常复杂的激酶。以它为主线 的信号传递途径与其他多种途径有着交联作用，从而诱导多种细胞的增殖、分化 和调亡等行为，在炎症反应的细胞因子网络中起主要作用。本实验试图明确ERK 与脑神经细胞凋亡之间的关系。 材料与方法 一、动物模型 用LPS腹腔注射的方法制备大鼠内毒素血症动物(Wistar大鼠，日龄10天，体重 机分为2组，生理盐水对照组(NS)，LPS组(LPS)，所有存活动物按设定时间断 头处死，立即开颅取脑，冠状切片留作光镜观察。 二、实验方法 取大脑冠状切片，用福尔马林缓冲液固定，24h1为常规脱水及石蜡包埋。制成 6岬连续切片。 1、采用TUNEL法原位标记DNA片段检测凋亡细胞光学显微镜下观察的判 断标准：镜下凋亡细胞表现为胞浆淡染或不着色，胞核固缩，着色深的TUNEL阳 性细胞。每张片高倍镜下计数5个定点视野阳性细胞数。 2、ERK免疫组织化学染色细胞质和／或细胞核内出现棕色染色为阳性。阳 性细胞的染色强度转变为量化指标，计算其平均光密度。 么} 申 当口7R l、镜下凋亡细胞表现为胞浆淡染或不着色，胞核固缩，着色深的TUNEL阳 h可见 性细胞。LPS组6h开始出现凋亡细胞，但是与NS组比较无明显差异，12 凋亡细胞数逐渐增多，72h仍明显高于NS组，差异有统计学意义(P0．01)。 2、ERK免疫组化结果判定，蛋白定位于胞浆内，ERK染色以细胞质和／或 细胞核内出现棕色染色为阳性，6h时LPS组ERK表达高于NS组，有明显的统计学意 (PO．05)。 0．01)。72h时两组间差异不明显，无统计学意义，