人脱细胞羊膜负大鼠骨髓间充质干细胞构建组织工程膀胱的实验研究.pdf

中文摘要 人脱细胞羊膜负载大鼠骨髓问充质干细胞构建组织工程膀胱的 实验研究 摘 要 第一部分大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养以及诱导、分化成平 滑肌样细胞的实验研究 目的：采用全骨髓培养法结合贴壁法从大鼠骨髓中分离骨髓间充质干 细胞，在体外培养、纯化、扩增、传代，应用1％--甲基亚砜(DMSO) 和大鼠膀胱组织匀浆上清液诱导分化成平滑肌样细胞，探讨为组织工程膀 胱的构建提供种子细胞的可能性。 方法：无菌条件下取大鼠双侧股骨、胫骨和胸骨，用吸取D．Hank’S液 养基中，37℃、5％CO。环境下进行培养，应用全骨髓培养法结合贴壁分 离的方法进行纯化。待细胞达95％融合时，用0．125％的胰酶．0．02％的 胞生长特点。HE染色光镜观察细胞形态特征。扫描电镜(SEM)观察细 胞表面的超微结构特征。利用MTT法测定大鼠骨髓间充质干细胞生长曲 线，了解细胞生长特性。取第4代大鼠骨髓间充质干细胞用1％二甲亚砜 (DMSO)预诱导8小时，然后应用大鼠膀胱组织匀浆上清液诱导7天。 倒置相差显微镜观察诱导分化后的大鼠骨髓间充质干细胞形态学的变化