非编码基因Z38荷瘤裸鼠的研究及转基因小鼠构建和鉴定.pdf

摘 要 最近越来越多的研究发现了众多的非编码RNA，并且其功能也被 逐渐鉴定出来。目前研究非编码RNA已经是当前生命科学研究的前 沿热点，这些小分子RNA在基因表达调控中扮演着重要的角色，几 乎存在于所有的高等真核生物中，缺乏明确的开放阅读框，不编码蛋 白质。本实验室在前期工作中通过抑制消减杂交实验发现一个类似 mRNA的非编码基因，暂时命名为Z38，该基因在乳腺癌中高表达， 目前还没有关于该基因的功能报道。 为了在体内研究Z38的生物学功能，本研究构建了加终止密码子 Z38的真核表达载体，转染HBLl00细胞将其注射裸鼠，结果表明5 只裸鼠有3只有肿瘤长成，而对照组有5只裸鼠只有1只长肿瘤，且 瘤生成时期较晚和生长速度较慢。同时，构建了一个由MMTV启动 子驱动表达Z38的真核表达载体，通过显微注射的方法建立了该基因 的转基因小鼠。用PCR的方法鉴定了4只Z38的转基因小鼠，且该 4只小鼠都发生了乳腺肿瘤，HE染色后证明是乳腺腺癌。提取这些 转基因小鼠乳腺肿瘤组织的RNA，用PCR的方法证明了Z38在肿瘤 组织的高表达。 本研究成功构建了非编码基因Z38的转基因小鼠，Z38在转基因 小鼠乳腺肿瘤组织中高表达，该转基因小鼠的建立为Z38的功能研究 提供了良好的动物模型。 关键词： Z38荷瘤裸鼠非编码RNA转基因小鼠 Ⅱ Abstract Withthe of technology， developmentgenome—widesequencing their moreandmore characterized,and noncodingRNA(ncRNAs)were cellularrolesareinthe of revealed．NowncRNAhave processbeing in in lifescience．Thesesmallmoleculesexist becomea the hotspot almostall lackof identifiable clearly open highereukaryotes，they translatefunctional have directly，and frame(ORF)to proteins reading rolesinthese the work， previous regulation organisms．In veryimportant mRNA our founda like bysuppression laboratory noncodinggene subtractive thatcal