兔角膜内皮细胞力仿生培养及调控机制的研究.pdfVIP

甲文捅要 中文摘要 目的 本研究拟通过体外压力培养平台，分析不同压力梯度下角膜内皮细胞的形 态和结构特点，以及其生物学功能的变化规律。探讨正常眼压对角膜内皮细胞 活性的正向调节作用，为建立旨在提高角膜内皮细胞培养质量的三维仿生培养 系统提供理论依据，构建工程化角膜内皮细胞移植膜。阐明病理性高眼压下角 膜内皮细胞损伤的病理基础和调控环节，为青光眼治疗策略中的内皮细胞保护 提供实验依据。 方法 第一部分角膜内皮细胞培养技术的改良 将带有兔角膜内皮细胞的后弹力层完整撕下，胰蛋白酶一EDTA联合酶化， 纯化的角膜内皮细胞进行体外培养。倒置显微镜下观察细胞形态，描记细胞生 长倍增曲线。神经元特异性烯醇化酶抗体进行细胞表型鉴定。苏木素一伊红(HE) 染色以及茜素红一台盼兰联合染色分析细胞活性，流式细胞仪检测细胞体外生 长过程中AnnexinV．PE的表达情况，透射电镜和扫描电镜进行细胞超微结构形 态的观察。 第二部分角膜内皮细胞压力仿生培养的研究 设计并制作自动充压范围为0--60mmHg的压力维持培养装置，测定预设压 力的维持时间，确定自动充压的时间点。将接种了传代角