血必净注射液对体大鼠缺血再灌注心肌热休克蛋白70表达的实验研究.pdfVIP

·中文论著摘要· 血必净注射液对离体大鼠缺血再灌注心肌热休克蛋白 70表达的实验研究 目 的 心肌缺血再灌注损伤是心外科手术常见的组织器官损伤，随着器官移植等复 杂手术的开展，再灌注损伤已越来越受到人们的重视。但是，到目前为止，其确 切的发病机制仍不十分清楚，目前的研究主要集中在氧自由基形成、细胞内钙超 shock 载、细胞凋亡、氧及能量利用障碍等方面。有研究表明，热休克蛋白70(heat 70 proteinHSP70)能保护心肌收缩力，减少心肌缺血坏死范围，并且有抗心律失常 作用，通过诱导热休克蛋白70的产生能够明显减轻心肌缺血再灌注损伤。近年来， 中药在心肌缺血再灌注损伤的防治方面取得了一定进展，而血必净注射液就是从 36组中药处方中筛选而来，其有效成分主要有丹参、川芎嗪、阿魏酸、芍药苷、 红花黄色素A等，具有抗细菌毒素、降低内毒素水平、调节免疫及炎性介质、改 善微循环、保护血管内皮细胞等作用，并通过提高超氧化物歧化酶活性等途径， 保护和修复应激状态下受损的脏器。本研究采用离体心脏缺血再灌注损伤模型， 排除了心脏在体时受神经、体液等多种因素的影响，同时也排除了药物分布、代 谢等因素的干扰，观察血必净注射液对心肌的直接作用，明确其对缺血再灌注损 伤心肌是否具有保护作用，并探讨其可能的机制，从而为临床合理用药提供理论 依据。 材料与方法 1、实验动物及分组 组)和血必净组(E组)，每组15只。 2、建立模型 大鼠腹腔注射10％水合氯醛麻醉后，腹腔注射肝素钠抗凝，然后将大鼠仰卧 位固定于操作台上，正中剪开胸骨，小心迅速分离心脏，充分暴露心脏及大血管， 在主动脉根部稍往上将主动脉和其他血管一起剪断，立即将心脏置于盛有4。C冷 K．H液的弯盘中，在液面下找出主动脉断端，将主动脉插管插入，迅速接到 分钟，保持温度为37C，灌注压力为75cmH20。C组在K-H缓冲液灌注平衡15 分钟后，给予灌注ThomasII停搏液使全心停搏30分钟，然后再重新灌注恒温恒 压的K．H缓冲液使其复跳并继续灌注120分钟。E组在ThomasII停搏液中加入血 必净注射液，其余处理均同C组。实验过程中留取的冠脉回流液标本立即置于．20℃ 冰箱保存，实验结束时取部分心尖部组织，置于10％甲醛中固定，4。C冰箱保存， 其余心肌置于．70C冰箱保存。 3、检测指标 的冠脉流出量，并取出其中3ml用全自动生化监测仪检测肌酸激酶的含量；用酶 联免疫法测心肌中热休克蛋白70的含量；在光学显微镜下观察心肌形态学变化。 4、数据分析 采用SPSS 13．0统计软件进行数据处理，计量资料以均数士标准差(工±s)表 示，组间比较采用重复测量数据的方差分析，两两比较用多重比较t检验，以P0．05 为差异有统计学意义。 结 果 l、血必净组酶联免疫法检测缺血再灌注120分钟心肌组织热休克蛋白70的 含量与对照组比较明显增多(P0．05)。 2、血必净组与对照组在缺血前肌酸激酶含量差异无显著性(PO．05)；再 灌注后相应时间段的肌酸激酶含量血必净组明显低于对照组俨O．05)。 3、血必净组与对照组在缺血前冠脉流量差异无显著性(P0．05)；再灌注 后相应时间段的冠脉流量血必净组明显高于对照组(尸O．05)。 4、心肌结构变化：血必净组心肌细胞基本正常，炎症细胞浸润、聚集较少； 对照组心肌组织炎症细胞浸润、聚集明显。 2 结论 1、血必净注射液可以显著增加心肌组织热休克蛋白70的生成，并可能通过 增加热休克蛋白70的含量来实现其心肌保护作用。 2、血必净注射液可以增加缺血再灌注心肌的冠脉流出量，抑制心肌肌酸激 酶的释放，对心肌产生保护作用。 3、血必净注射液可以维持心肌细胞的正常结构，减轻炎症反应，保护心肌 功能。 关键词