四翅滨藜盐胁迫应答基因AcPsbQ1的克隆及在酵母中的功能分析.pdfVIP

Hereditas (Beijing) 2015 年 1 月, 37(1): 84 ―90 研究报告 四翅滨藜盐胁迫应答基因AcPsbQ1 的克隆及其在酵母 中的功能分析 孙新华，贾攀，张继超，潘洪玉 吉林大学植物科学学院，长春 130062 摘要:光系统II 亚基蛋白Q(Photosystem II subunit Q, PsbQ)是组成光系统II(PSII)复合体的重要外周蛋白之一， + − 对维持PSII 放氧活力起重要作用。在盐胁迫下，高浓度的Na 和Cl 在叶绿体中积累会严重破坏叶绿体的结构， 抑制光合作用，使植物生长缓慢。文章通过筛选盐生植物四翅滨藜(Atriplex canescens) cDNA 文库，获得一个 在PSII 中与放氧关系密切的放氧复合体蛋白基因PsbQ ，命名为AcPsbQ 1(GenBank 登录号：KJ027025) 。AcPsbQ 1 基因开放阅读框为 699 bp ，编码由233 个氨基酸组成的前体蛋白。为了研究该基因的功能，文章克隆了AcPsbQ 1 基因并转化至酵母中，高盐和干旱胁迫处理实验表明转 AcPsbQ 1 基因酵母相比于野生型酵母对高盐和干旱有 更强的耐受力。为了进一步研究AcPsbQ 1 是否参与植物抗逆应答反应，利用实时荧光定量PCR 法测定AcPsbQ 1 在胁迫处理条件下的表达变化。结果表明，用0.4 mol/L NaCl 处理四翅滨藜 12 h 后，AcPsbQ 1 基因的表达量明 显高于未处理的对照，表明AcPsbQ 1 基因的表达受盐胁迫诱导，同时，干旱胁迫也会提高AcPsbQ 1 基因的表 达水平。上述结果表明该基因可能参与盐生植物四翅滨藜的抗逆胁迫应答反应。 四翅滨藜；AcPsbQ 1；盐诱导；酵母表达；qRT-PCR 关键词: Cloning and characterization of a salt responsive gene AcPsbQ1 from Atriplex canescens Xinhua Sun, Pan Jia, Jichao Zhang, Hongyu Pan College of Plant Science, Jilin University, Changchun 130062, China Abstract: PsbQ is an extrinsic subunit of the photosystem II in eukaryotic photosynthetic organisms. Numerous studies have demonstrated that PsbQ can stabilize the inorganic cofactors and enhance the oxygen release in PSII. The decrease of photosynthesis rate under salinity condition is normally attributed to the high concentration of injurious ions, such as Na+ – and Cl , which accumulate in the chloroplast and damage thylakoid membrane under salinity stress. In this study, AcPsbQ1 was isolated from a halophyte Atriplex canescens cDNA library. The AcPsb Q1 contains an 收稿日期: 2014−07−15; 修回日期: 2014−10−26 基金项目: 吉林省发改委产业研发项目(编号：2013C001) ，农业部抗病虫转基因大豆新品种培育项目(编号：2013Z和国家科技支撑 计划课题项目(编号：2014BAD14B02)资助 作者简介: 孙新华，硕士研究生，专业方向：真菌分子生物学与植物抗逆及抗病基因工程。E-mail : xinhua_sun@126.com 通讯作者:潘洪玉