cox-2选择抑制剂塞来昔布对人子宫内膜腺癌抑制作用的研究.pdf

COX-2 选择性抑制剂塞来昔布对人子宫内膜腺癌 抑制作用的研究 中文摘要 目的：探讨COX-2 选择性抑制剂塞来昔布对人子宫内膜腺癌的体 外及体内抑制作用及其相关机制，为治疗子宫内膜腺癌提供实验依 据。 方法： 一．体外试验 以不同浓度的塞来昔布（25-200umol/L）分别以不同时间处理体 外培养的HEC-1B 细胞，用MTT 法检测细胞增殖，用流式细胞术检测 细胞周期和凋亡，用透射电镜观察细胞超微结构的改变，用Transwell 小室测定细胞侵袭力，用RT-PCR 检测COX-2 mRNA 的表达。 二．体内试验 1．30 只裸鼠皮下注射 HEC-1B 细胞，建立人子宫内膜癌裸鼠荷 瘤模型。待成瘤后，裸鼠随机分为对照组与实验组，对照组予生理盐 水口服2 周,实验组分别予塞来昔布4mg/d 和2mg/d 口服2 周。 2．从治疗开始每3 天计算瘤体积一次，描绘肿瘤生长曲线；治 疗结束后处死裸鼠，剥出瘤组织称重，计算抑瘤率，瘤组织标本分别 用RT-PCR 检测COX-2 mRNA 的表达,用免疫组化法检测COX-2 蛋白的 表达和微血管密度（MVD）。 结果： 1．MTT 结果显示塞来昔布对HEC-1B 细胞的增殖具有抑制作用， 且呈现时间和浓度依赖性；流式细胞术结果显示塞来昔布能使HEC-1B 细胞G /G 期细胞比例增加，S 期和G /M 期细胞比例减少，细胞的凋 0 1 2 亡率增加，与对照组相比差异有统计学意义（P0.05）；透射电镜结 果发现塞来昔布能使细胞出现凋亡的特征性改变，低浓度处理的细胞 呈现空泡化的早期凋亡改变，高浓度则出现晚期凋亡的凋亡小体；随 着塞来昔布浓度的增加（50-200umol/L），Transwell 侵袭试验结果 表明细胞穿膜数目逐渐减少， RT-PCR 结果显示 COX-2 mRNA 的表达 逐渐减弱，与对照组相比均有显著差异（P0.05）。 2．塞来昔布对裸鼠皮下移植瘤的生长具有明显的抑制作用，且 随着药物浓度的增加，抑瘤作用逐渐增强（抑瘤率分别为 32.4％和 48.6％）。同时随着药物浓度的增加，RT-PCR 结果显示移植瘤组织 COX-2mRNA 的表达逐渐减弱，免疫组化结果显示移植瘤组织COX-2 蛋 白的表达及微血管密度（MVD）逐渐减少，实验组与对照组之间及各 实验组之间的差异均有统计学意义（P0.05）。 结论：COX-2 选择性抑制剂塞来昔布在体外及体内对人子宫内膜 腺癌均具有明显的抑制作用，其机制可能与下调肿瘤细胞中COX-2 的 表达，减少组织中微血管密度MVD 有关。 关键词：环氧化酶－2，子宫内膜癌，增殖，凋亡，侵袭，裸鼠 Inhibitory Effects of Cyclooxygenase-2 selective inhibitor Celecoxib on Human Endometrium Adenocarcinoma ABSTRACT Objective： To investigate the in-vitro and in-vivo inhibitory effect of Cyclooxygenase-2 selective inhibitor Celecoxib on human endometrium adenocarcinoma and the mechanism, providing theoretical basis for the treatment of human endometrium adenocarcinoma. Methods： 1.The HEC-1B cells were treated with different concentrations of celecoxib （25-200umol/L ）