rna干扰抑制颈癌caski细胞株中il-8基因表达的研究.pdfVIP

山两仄丰}人掌坝l7n【^正 RNA干扰抑制宫颈癌CaS瞄细胞株中 IL．8基因表达的研究 中文摘要 宫颈癌(cervicalcancer．CC)是鼓常见的§j科恶件肿瘤之．其发生率居全球第，f≯， 我罔是宫颈癌的高发国家，近年来发病有明显年轻化趋势，严重威胁着女性的健康和生命。 IL．8是与炎症相关的多功能趋化因子，不仅可以诱导肿瘤血管生成，还可促进肿瘤细胞的 增隹和迁移。已有研究表明IL一8与多种肿瘤(如宫颈癌，乳腺癌、卵巢癌、胃癌等)的浸 Cervical 润，转移、临床分期及预后密切相关。本课题组前期对早期宫颈鳞癌(Squamous 织中的表达较无淋巴结转移宫颈癌组织高3．4倍，并经体外实验证明IL一8可通过促进宫颈 癌细胞的增生，迁移、与内皮细胞的黏附作用及促进宫颈癌的血管生成等机制提高宫颈癌 的浸润转移能力…。RNA干扰(RNA 有效方法，本课题通过构建lL一8小发央状RNA(shorthairpinRNA，shRNA)真核表达载 体，探讨其能否抑制宫颈癌CaSki细胞株中IL．8基因表达，以及对宫颈癌细胞生物学行为 的影响，探索RNA干扰技术作为宫颈癌基因治疗新策略的可行性。 细胞株中IL．8基因和蛋白表达的抑制效果，以及其对宫颈癌细胞增生、趋化运动的抑制作 用。 作用靶点的寡核苷酸序列及l对阴性对照序列，并将其定向克隆入真核表达载体PGenesil—l 形成实验以及Boyden小室法检测转染前后各组增殖和趋化运动有何差异。 shRNA表达质粒对细胞形态及生长状态无明显影响。72小时经多视野阳 现各组转染IL．8 shRNAl 与IL．8 shRNAl与IL一8 结果基本一致，且IL一8 染CaSki细胞进行免疫细胞化学检测，结果表明IL一8呈弱阳性表达，而转染阴性对照质粒 山阳仄‘f人学坳lJ掌位论上 进行实验，结果表明IL一8shRNA2质粒表达载体转粢后口丁明显抑制癌细胞的增值、趋化作 用，与对照组相比具有显著差异(PO．05)。 和蛋白的表达，并且可以降低CaSki细胞的兜降形戍率，抑制其增螭和趋化运动能力，有 望成为宫颈癌基因治疗的合理策略之一。 关键词：RNAi，白细胞介素8，宫颈癌，基因治疗 ¨ 山西医科大学硕0学位沦空 ofRNA on Effects Interferencethe of Inhibitory Expression IL一8 inCervicalCancerCellLineCaSki Oncogene ABSTRACT Carcinomaoftheuterinecervixthatwe isthesecond female tosee commonest a咒usually caueerintheworld．The liesinfirst inour andbecomeoneofthemain prevalence place country