《生物化学实验手册》解读.docVIP

生物化学学时： 学分：课程属性：专业必修课 开课单位：华侨大学生物医学学院 先修课程：高等数学、普通物理学、无机及分析化学、有机化学 课巩固和加深对课程中基本理论知识的理解，学生必须完成基本要求：拟定记录表格写出氨基酸的分离鉴定—纸层析法紫外分光光度法测定蛋白质的含量 Bradford法测定蛋白质的含量Folin-酚法测定蛋白质的含量 垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 脲酶的动力学研究 用正交法测定几种因素对酶活性的影响 DNA的提取与测定 琼脂糖凝胶电泳实验 还原糖和总糖的测定可溶性糖的硅胶G薄层层析 维生素C含量的定量测定 卵磷脂的提取、纯化和鉴定实验：氨基酸的分离鉴定—纸层析法 一、实验目的 通过对氨基酸的分离，学习运用纸层析法分离氨基酸混合物的基本原理，掌握纸层析的操作方法。 二、实验原理 纸层析（Paper Chromatography，简称PC），是以滤纸作为惰性支持物的分配层析，滤纸纤维上有亲水性的羟基，通过吸附一层水作为固定相，通常把有机溶剂作为流动相。有机溶剂自上而下流动称为下行层析，自下而上流动称为上行层析。流动相流经支持物时，与固定相之间连续抽提，使物质在两相间不断分配而得到分离。物质被分离后在纸层析图谱上的位置用Rf值（比移值）来表示： Rf值 = 原点到层析点中心的距离/ 原点到溶剂前沿的距离 在一定条件下某种物质的Rf值是常数，其大小受物质