培哚普利对大鼠肌缺血-再灌注损伤早期保护机制研究.pdfVIP

山西医科人学顾：l：学位论文 中文摘要 研究背景：随着介入治疗的迅速发展，心肌缺血再灌注损伤成为人们研究的热点之一。目 前，缺血再灌注损伤发生的机制尚未完全阐明，氧自由基生成、血管内皮损伤、钙超载和 白细胞激活已较为公认，但并不能解释全部现象。最近的研究显示，心肌缺血再灌注损伤 还与炎性因子产生、细胞凋亡、粘附分子表达及核转录因子调控等机制有关。有研究显示 再灌注启动了一个典型的炎症反应，多形核中性粒细胞的浸润，已成为心肌缺血再灌注后 的主要问题。ToU样受体4是新近发现的天然免疫中的细胞跨膜受体及病原模式识别受体， 其除了参与病原微生物触发的炎症反应外，有研究提示TLR-4也参与了缺血组织损伤的炎 症反应。在正常生理情况下，内皮细胞通过组成型一氧化氮合酶持续合成少量一氧化氮， 对维持正常的血管内皮功能起重要作用。近年发现NO减少亦是P心激活的一个重要因素， 心肌缺血再灌注早期可导致内皮细胞功能障碍，内源性N0合成减少，抗P心作用减弱， 加重心肌缺血再灌注损伤。 目的：培哚普利在动物实验有抗心肌缺血再灌注损伤作用，减轻心肌缺血再灌注损伤引起 的心肌细胞结构的改变、心肌出血、心肌顿抑以及心律失常等，但其心肌保护作用的具体 机制尚待进一步研究。 本研究分两部分，第一部分观察培哚普利对缺血再灌注早期Toll样受体4蛋白的影 响，探讨培哚普利对心肌缺血再灌注损伤保护作用与Toll样受体4蛋白介导的炎症反应 的关系；第二部分腹腔注射NO非选择性阻断剂(L．N伽)，观察培哚普利对心肌缺血再 灌注损伤保护作用与NO的关系，初步探讨培哚普利对心肌缺血再灌注损伤的可能保护机 制。 第一部分： 方法：30只WiStar大鼠随机分为3组：假手术组，缺血再灌注组及培哚普利组。培哚普利 组灌服培哚普利4mg／l(g，每日1次，共7天。假手术组和缺血再灌注组分别灌服相应体积 的生理盐水。采用大鼠左冠状动脉前降支结扎法建立大鼠缺血再灌注模型，缺血30分钟， 再灌注1小时。于实验结束时，取出心脏于4％多聚甲醛固定、石蜡包埋切片，HE染色观 达。 结果：①与缺血再灌注组相比，培哚普利组炎症损伤减轻；②培哚普利组心肌细胞凋亡指 蛋白平均积分光密度值低于缺血再灌注组但高于假手术组(P0．05)。 第二部分： 方法：40只Wistar大鼠随机分为4组：假手术组，缺血再灌注组，培哚普利组及联合用药 组。假手术组和缺血再灌注组灌服和腹腔注射等量的生理盐水，假手术组只在左冠状动脉 山西医科人学颂．．1：学位论文 前降支下穿线，不结扎；培哚普利组灌服培哚普利4m眺g，腹腔注射等量的生理盐水；联 合用药组灌服培哚普利4mg／l(g，腹腔注射L-NAME15mg／l【g；每日1次，共7天。结扎大 鼠左冠状动脉前降支，建立大鼠缺血再灌注模型。测定血流动力学参数，左室收缩压 率(．栅懈)。光镜观察心肌形态学改变，TUNEL法检测细胞凋亡指数。 假手术组在缺血30min及再灌注30min，60min时血流动力学平稳，无统计学差异 (P0．05)；缺血30 (P0．05)，但后三组间无统计学差异(P0．05)；再灌注30min，60min后缺血再灌注组 利组相比缺血再灌注组和联合用药组有统计学差异(P0．05)。缺血30min后三组动物 (P0．05)，再灌注30 普利组略有下降与缺血再灌注组及联合用药组相比有统计学意义(PO．05)(详见表2．2)。 ②假手术组散在心肌纤维肿胀、变性，间质轻度水肿。缺血再灌注组及联合用药组大鼠心 肌纤维断裂坏死，大量炎性细胞浸润，而培哚普利组出血、坏死损伤轻微，有少量炎性细 胞浸润。③与缺血再灌注组及联合用药组相比，培哚普利可减轻心肌细胞凋亡数(P0．05)， 培哚普利组及联合用药组凋亡细胞数也有统计学差异(P0．05)，均明显高于假手术组 (P0．05)。 结论： ①缺血再灌注过程中存在细胞凋亡，细胞凋亡和ToU样受体4的表达是一个动态的过程。 培哚普利可减少在体大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞调亡指数，可能机制之一是通过减少 Toll样受体4蛋白而减轻白细胞介素．6，TNF．Q等表达，减轻炎症反应，保护缺血再灌注 心肌。 ②培哚普利的心肌保护作用可部分被腹腔注射NO非选择性抑制剂L-NAME所抑制，提 示培哚普利对心急缺血再灌注损伤的保护作用可能与NO有关。 关键词：缺血一再灌注培哚普利细胞凋亡TLR一4蛋白NO