小鼠小肠上皮细间淋巴细胞（iiel）与脾t淋巴细胞间基因表达差异的分析与iiel功能初步研究.pdf

中国协和医科土擘博士学值论支 小鼠小肠上皮细胞间淋巴细胞(iIEL)与脾T淋巴细胞间 基因表达差异的分析与iIEL功能初步研究 [摘 要] 小肠上皮细胞问的淋巴细胞(intestineintraepithelial 位于小肠绒毛柱状上皮细胞间的一类组织松散的浸润淋巴细胞。它们在粘膜 免疫防御和口服免疫耐受形成等方面起着重要的作用。它们在形态、表型、 起源、发育、以及功能上与传统部位(脾和淋巴结等)的淋巴细胞有所不同， 而这种差异的本质应该存在着相应的分子基础。本研究旨在比较小鼠iIEL与 脾脏T淋巴细胞的基因表达差异，初步解释上述基因表达差异之特点：并且 对ilEL进行了初步的研究，咀期为阐明ilEL结构与功能特征提供资料与依据。 首先，通过建立ilEL与脾脏T淋巴细胞的cDNA差异减除文库，来比较 两者的基因表达差异并初步分析ilEL优势表达的基因。我们采用pemoll密度 梯度法分离iIEL，尼龙毛柱法分离脾脏T淋巴细胞，两者的纯度都在90％以 上。应用改良后的差减杂交法，在消化后的cDNA两端连接特异的衔接子， 通过减除杂交从ilEL中去除与脾T淋巴细胞相同的表达基因，再经抑制性 库中筛选出50条有