应用功能分类基芯片筛选小鼠组织细胞肉瘤l-ⅱ转移相关基因.pdf

应用功能分类基因芯片筛选 小鼠组织细胞肉瘤L一1I转移相关基因 研究生：彭芳 导师： 朱建思教授 中文摘要 目的：采用基因芯片技术比较筛选前的小鼠组织细胞肉瘤L—II与筛选后的具有 高转移能力的第9代转移瘤细胞之间的基因表达谱，利用生物信息学方法筛选 出与淋巴瘤侵袭和转移相关的差异基因。 方法：L．II瘤细胞接种小鼠胁部皮下，取其肺转移灶制成细胞悬液接种另--d,鼠 体内，再取其肺转移灶继续传代。对筛选前的L．II瘤株和筛选后的第9代瘤株 的细胞形态、生存时间、肿瘤生长曲线、免疫组化的差异进行了比较。再分别 提取筛选前后瘤细胞的mRNA，通过逆转录将细胞eDNA进行生物素标记，用 美国Superarray公司的含l13个目的基因的肿瘤转移基因芯片杂交，GEArray软 件对结果进行分析，筛选出传代前后表达有差异的基因。对部分有差异表达的 基因用R1-PCR和Westernblot进行分析鉴定。 结果：用体内转移灶连续传代法筛选小鼠组织细胞肉瘤L．II至第9代。形态学 观察：光镜下筛选前后瘤细胞形态结构基本～致，细胞呈弥漫分布，