日本脑炎病毒核壳蛋白酵母双杂交诱饵载体构建及自激活检测.pdf

·中文论著摘要· 日本脑炎病毒核衣壳蛋白酵母双杂交诱饵载体构建及 自激活检测 目 的 构建JEVC蛋白编码基因的酵母双杂交诱饵载体，并检测其蛋白表达产物对 酵母细胞有无毒性及对酵母细胞内报告基因有无自激活效应，为筛选及验证JEV C蛋白相互作用相关蛋白奠定实验基础。 材料与方法 一、实验材料 1、质粒、载体、菌株、细胞 质粒pMD—JC由本实验室构建保存，所选表达载体pMDl9-Tsimple购自 TaKaRa公司；大肠杆菌感受态细胞E．coliCellsJMl09购自TaKaRa公 Competent 司，用于重组质粒构建、转化；酵母菌Y2H 验。 2、主要试剂 PCR用DNA聚合酶(Code No．DR010S)、质粒小剂量提取试剂盒(Code No．DV801A)、琼脂糖凝胶DNA纯化试剂盒(CodeNo．DV805A)、酶促反应DNA