第五章 微生物的生长繁殖与生存修改10月18解读.pptVIP

第五章 微生物的生长繁殖与生存因子 第一节 微生物的生长繁殖 一 什么叫微生物的生长、繁殖？ 微生物生长(Growth)：是指细胞物质有规律地、不可逆增加的生物过程。 微生物繁殖(Reproduction)：是微生物生长到一定阶段由于细胞内各种细胞结构的复杂和重建导致产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的整个生物学过程。 微生物的个体生长和群体生长 单细胞微生物的生长：一个微生物个体应具备生长和繁殖的全能性。单细胞微生物的生长就是细胞的不断增大。 单细胞微生物的繁殖：但这种过程 在适宜的环境中，一种微生物如大肠杆菌（E.coli），从一个个体（细胞）出发，通过生长与繁殖，逐渐形成与秦代细胞相似的子代细胞，使得个体数量增加，这种现象与过程称为单细胞微生物的繁殖。 微生物个体生长与个体繁殖是持续交替进行的，所导致的结果就是群体生长。因此，群体生长是以微生物的个体生长与繁殖为基础的。 多细胞微生物的生长与繁殖 多细胞微生物的生长只是细胞数量增加,不伴随个体数目的增加。 多细胞微生物的繁殖：如果不但细胞数目增加，个体数目也增加，则称为多细胞微生物的繁殖。 世代时间：细菌两次细胞分裂之间的时间。不同微生物的生长繁殖速度不同，所以世代时间也不同。原核微生物的繁殖速度比真核微生物快，专性厌氧菌的世代时间多数比好氧菌长。 二、微生物的群体生长规律 对微生物群体生长的研究表明，微生物的群体生长规律因其种类不同而异，单细胞微生物与多细胞微生物的群体生长表现出不同的生长动力学特性。但就单细胞微生物来说，在特定的环境中，不同种的微生物表现出趋势相近的生长动力学规律。 （一）、细菌纯培养生长曲线（分批培养） 是将某种单细胞微生物少量接种到恒定容积的液体培养基中培养，定时取样分析。以菌数的对数为纵坐标，生长时间为横坐标作图而的得到的生长曲线。 细菌群体的生长繁殖可分为四期： 1．迟缓期（Lag phase）: 2. 对数期(Logarithmic phase): 3．稳定期（Stationary phase）: 4．衰亡期（Decline phase）: 1．迟缓期（Lag phase）: 细菌接种至培养基后，对新环境有一个短暂适应过程（不适应者可因转种而死亡）。此期曲线平坦稳定，因为细菌繁殖极少。迟缓期长短因素种、接种菌量、菌龄以及营养物质等不同而异，一般为1～4小时。此期中细菌体积增大，代谢活跃，为细菌的分裂增殖合成、储备充足的酶、能量及中间代谢产物。 2.对数期(Logarithmic phase): 又称指数期(Exponential phage)。此期生长曲线上活菌数直线上升。细菌以稳定的几何级数极快增长，可持续几小时至几天不等（视培养条件及细菌代时而异）。此期细菌形态、染色、生物活性都很典型，对外界环境因素的作用敏感，因此研究细菌性状以此期细菌最好。抗生素作用，对该时期的细菌效果最佳。 细菌的世代时间G G=(t2-t1) / n 因为 n=3.3(lgX2-lgX1) 所以 G=(t2-t1) / [3.3lg(X2/X1)] n ：繁殖世代数； X：不同时期的菌数。 3．稳定期（Stationary phase） 1）生长速度为零，新生=死亡，达到动态平衡； 2）活菌数的总量达到最大值； 3）胞内的储藏物开始形成（如肝糖粒、脂肪粒等）； 4）某些芽孢菌的芽孢开始形成； 5）某些细菌过量积累次级代谢产物，如抗生素、维生素等。 4．衰亡期（Decline phase） 1）营养物质耗尽，微生物进行内源呼吸； 2）有毒代谢产物产生，生长速率负增长； 3）细胞形态多样，出现畸形，形成衰退型； 4）蛋白水解酶活跃，出现细胞自溶现象； 5）芽孢细菌芽孢大量释放。 微生物纯培养技术 纯培养(Pure culture)：微生物学中将在实验室条件下从一个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代称为纯培养 获得纯培养的技术 稀释平板分离法; 平皿划线分离法; 单细胞挑取法 ;利用选择性培养基分离法; 富集培养 ; 二元培养：是纯培养的一种特殊形式，主要用于分离寄生微生物的方法。 共培养(Coculture). 三 研究微生物生长的方法 培养的方法：分批培养、连续培养、同步培养。 (一)?分批培养：将一定量的微生物接种在一个封闭的、盛有一定量液体培养基的容器内，保持一定的温度，pH和溶解氧量，微生物在其中生长繁殖；结果出现微生物数量由少变多，达到高峰又由多变少，甚至死亡的变化规律，即细菌的生长曲线。 (二)?连续培养：有恒浊连续培养和恒化连续培养两种。 恒浊连续培养：使培养基中的细菌浓度恒定，以浊度为控制指标的培养方式。通过调节进水流速，使浊度达到恒定。 恒化连续培养：维持培养基中的营