家兔自体骨髓单核细胞移植治疗下肢缺血的研究.pdf

中文摘要 家兔自体骨髓单个核细胞移植治疗下肢缺血的研究 摘 要 目的：糖尿病足、动脉硬化闭塞症及血栓闭塞性脉管炎 等下肢缺血性疾病是临床上常见的致残性疾病，近年来发展 的于细胞技术为治疗下肢缺血的研究开辟了新的道路。为证 实骨髓单个核细胞移植治疗下肢缺血的可行性，建立家兔的 右下肢缺血模型并通过对家兔自体骨髓干细胞的采集、分离 及制备骨髓单个核细胞悬液，将其移植到家兔缺血的右下肢 中，通过移植前后的数字减影血管造影、免疫组织化学观察 新生毛细血管密度、及应用兔VEGF、bFGF、IL一1B试剂盒测 量血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、IL-1 B的含量，探讨自体骨髓单个核细胞移植治 疗下肢缺血的机理及其与细胞因子的关系，评价自体骨髓单 个核细胞移植治疗下肢缺血性疾病的安全性、可行性。 方法：1．选用5月龄日本大耳白兔40只，体重 2．5—3．OKg，随机分为四组：①对照组，未做任何干预。② 缺血组，将其制成右下肢缺血模型，未做其他干预。③PBs 组(磷酸盐缓冲液组)，将其制成右下肢缺血模型，用lml 注射器将0．Olmol／LPBS缓冲液分15点注射子右下肢股内 收肌群内。④治疗组，将其制备右下肢缺血模型2周后，用 X lml注射器将取其左髂骨骨髓制备的1106／ml的骨髓单个 核细胞悬液分15点注射于右下肢股内收肌群内。2．术后三 天，切取右下肢内收肌组织标本，测量其组织匀浆中的血管 内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、 中文摘要 IL一1 B的含量：四周后行数字减影血管造影术(DSA)，术后 取右下肢内收肌标本，CD34免疫组化检测毛细血管密度。3． 所得数据应用SPSSIO．0进行数据处理，统计学方法采用t检 验。 差异。动脉造影显示对照组右下肢血流通过股动脉通畅，缺 血组和PBS组血流受阻于股动脉结扎处，以远毛细血管生成 不明显，治疗组血流受阻于股动脉结扎处，以远毛细血管生 成明显，与已有的毛细血管相互连接形成毛细血管网。免疫 组织化学毛细血管染色在高倍镜(400X)下观察，对照组 标本毛细血管密度(毛细血管数／高倍镜)平均为16个，缺 血组和PBS组毛细血管密度平均为5个，治疗组毛细血管密 度为20．5个。干细胞移植的肌肉标本毛细血管密度明显高 比较差异无显著性(p0．05)。 结论：自体骨髓单个核细胞移植是～种简便、有效的治 疗下肢缺血性疾病的方法。 关键词：骨髓干细胞：自体；移植：下肢缺血 荚文摘要 ofthe of study transplantation Experimental of BM-MNCintreatmentischemic autologous in hindlimbrabbit ABSTRACT as arterialdiseasesuch diabetic objective：Ischemic oliteranand obliteransiS foot，arteriosclerosis thromboangiitis common diseasesinclinic．Inrecent disabling