同种异体组织工化软骨局部免疫豁免诱导的实验研究.pdfVIP

中文摘要 为了构建局部免疫耐受的同种异体组织工程化软骨，延长其在体内存活时 间．我们首先应用RT-PCR和1A克隆技术从激活的小鼠脾脏淋巴细胞总RNA 中扩增mFasLeDNA并克隆到T载体，并经测序确证。为了探讨逆转录病毒载 体系统转染同种异体软骨细胞的最佳条件，本研究利用增强型绿色荧光蛋白 (EOFP)具有表达荧光特异性高、易于检测等独特的优势，构建能稳定表达EGFP 的重组逆转录病毒载体EGFP．PLNCX2，转染同种异体软骨细胞，荧光显微镜观 察转染的效果，流式细胞仪测定转染的效率。为了观察逆转录病毒载体系统介 导基因转染同种异体软骨细胞后是否影响软骨的构建，利用以上EGFP重组逆转 F-127复合物构建兔同种异 录病毒载体转染的软骨细胞和组织工程材料plmonic 体组织工程软骨，荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察其构建过程和逆转录病毒 载体系统介导基因的体内表达格局；在掌握逆转录病毒载体系统介导基因的体外 免疫印迹、免疫组织化学、流式细胞仪和生物学活性等多种水平证实 F-127复合物构建兔同种异体组织工 体转染的软骨