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- 2016-03-17 发布于贵州
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哮喘大鼠肺组织的趋化素样因子1mrna的表达
哮喘大鼠肺组织中的趋化素样因子1mRNA的表达
摘 要
目的:应用实时荧光定量RT.PCR的方法,检测哮喘大鼠肺组织
中的CKLFlmRNA定量表达情况,探讨哮喘大鼠肺组织是否有
CKLFImRNA的高表达,从基因水平探讨支气管哮喘的发病机制。
方法:30只成年健康雄性SD大鼠,根据随机化分配的原则,将30
只大鼠按体重编号,采用随机排列表法分为哮喘组及对照组(N组):
再根据哮喘激发时间(1、3、7、14天)将哮喘组又分为A、B、c、
D四组,以卵蛋白(0、,A)作为过敏原、氢氧化铝为佐剂致敏SD大
鼠14天后,雾化吸入l%OVA激发制备哮喘大鼠模型。到末次激发
后24h处死大鼠,作肺泡灌洗液后细胞计数、分类计数;并观察肺组
织病理变化。同时取右肺中叶组织提取总RNA,再用紫外分光光度
计测定oD260与OD28。的分光光度值,计算出各组RNA的浓度与纯度,
并用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测RNA分子的完整性,然后用统计学方
法检测各组之间的RNA浓度与纯度的差异。利用实时荧光定量
PCR仪上进行体外扩增,获得各个样本循环指数增长期的起始,氧即
基因作为内参照物进行校正,以校正的相对拷贝数用单因素方差分析
进行检验,并分析各组之间的差异。结果:(1)
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