氧化损伤性白内形成过程中基质金属蛋白酶—2和9的表达及意义.pdfVIP

氧化损伤性白内障形成过程中基质金属蛋白酶一2和9的表 达及意义 中文摘要 目的检测氧化损伤性白内障形成过程中随着氧化损伤作用时间的延长晶状 体囊膜和晶状体纤维中基质金属蛋白酶(matrix 和9活性和基因表达的动态变化，探讨删P一2和9在氧化损伤性自内障形成过程中 的作用及意义。 方法利用过氧化氢诱导离体新西兰兔晶状体出现氧化损伤性白内障。无菌 条件下利用显微镜从后路取出晶状体，将晶状体随机分为两组，对照组置于DMEM 培养基中，H。O。组置于含有Immol／LH。O。的DMEM培养基中，37℃二氧化碳培养箱中 孵育，取6、12、24、48小时四个时间点停止孵育。取出晶状体，在显微镜下分离 出晶状体囊膜(包括其下的晶状体上皮细胞)和晶状体纤维后，分别利用酶谱法 分析其中MMP一2和一9活性变化，利用逆转录聚合酶链反应法(RT—PCR)测定ⅢP一2 和删P一9的基因表达的变化。 结果H202组晶状体在培养12小时后即出现混浊，24小时后出现了较明显的混 浊，培养48小时后混浊更加明显，而对照组晶状体仍然保持透明。酶谱法表明对 照组晶状体囊膜中和晶状体纤维中均未见删卜2和9的存在；H：0。组晶状体囊膜中 存在MMP一2和删P一9，而晶状体纤维中仅见MMP一9，末见删P一2的存在。实验组中 MMP～2和9的活性随时间的延长均有增强，其中各时间点之间差异有显著性的意 义。RT—PCR法发现，对照组晶状体囊膜和晶状体纤维中亦未见删P一2和删P一9 的表达；H202组晶状体囊膜中删卜2和9均有表达，而晶状体纤维中仅见MMP-9有表 达，其中各时间点之间差异有显著性的意义。 结论晶状体中删P一2和MMP一9基因表达的变化和活性的增高可能通过影响晶 状体上皮细胞的细胞外基质成分、改变晶状体囊膜组分参与了氧化性白内障的形 成。 关键词基质金属蛋白酶氧化损伤自内障酶谱分析逆转录聚合酶链反应 matrix and of significance Expression 9 oxidativecataract andin Abstract matrix To the of and objeefiveinvestigateexpressionmetalloproteinase(MMP)一2 after MMP一9inthelensesofnew-zealandrabbitsoxidative damage． and were Methodsofnew-zealandrabbitsweleexcisedlenses under Eyes separated andsterilizedcondition．Thelensesweredivided intocontrol microscope randomly wereincubatedin incubator．Theandfibre and C02 H202group．Lenses capsule group at mRNA was oflenseswerecollecte