抗stat5抗的制备及其在人乳腺癌发生发展中作用的研究.pdfVIP

中文 摘 要 抗STAT5抗体的制备及其在人乳膝癌发生发展中作用 的研究 摘 要 目的:信号转导与转录激活因子STAT5是在细胞因子的 信号传导中起关键作用的一种蛋白质，与乳腺癌的发生和发 展密切相关。然而，STAT5在乳腺癌发生、发展中的作用机 理尚未明确。本研究从转染STAT5基因的Sf21细胞中提取、 纯化了STAT5蛋白，常规免疫家兔制备抗STAT5抗体。应用 抗STAT5抗体采用免疫组化法和免疫印迹法检测正常乳腺组 织和乳腺癌组织中STAT5蛋白的定位和表达;应用RT-PCR 方法测定STAT5基因表达的差异;研究蛋白酪氨酸激酶JAK 抑制剂 I对人乳腺癌细胞 STAT5蛋白表达的影响，以探讨 STAT5在乳腺癌发生、发展中的作用及其机理，为乳腺癌的 早期诊断、制定合理经济的治疗方案及预后评价提供新的理 论依据。 方法:1.STAT5蛋白的提取和纯化:将 STAT5基因转 染Sf21细胞，于28℃培养48h，收集细胞置于冰上，用超声 波降解器和蛋白提取液裂解细胞并提取细胞中的总蛋白，分 别用高效Q