染色体8p上肝转移相关基因的筛选与初步验证.pdf

染色体8p上肝癌转移相关基因的筛选与初步验证 【摘要l丑的已发现人类多种类型的肿瘤中存在8号染色体短臂(8p)的改变； 本所既往的研究发现染色体8p缺失与肝癌转移有关，为进一步筛选肝癌转移相 关基因提供了靶点。本课题拟在此基础上，从基因表达水平进一步探讨染色体 8p与肝癌转移的关系，并且筛选出定位于染色体8p的与肝癌转移相关的基因。 方法首先定制包括染色体8P上全部322个基因的寡核苷酸芯片。然后运用定 制芯片，以10例来自肝海绵状血管瘤患者的正常肝脏组织RNA混合后形成的 样本池为对照，检测伴、或不伴有转移的肝癌组织标本各20例(20例伴有转移 者，同时检测肝癌原发瘤和转移灶组织标本)中相关基因的表达水平。在不同转 移潜能的细胞株(包括无转移潜能肝癌细胞株Hep3B、低转移潜能肝癌细胞株 Changliver)中进一步验证。经过芯片杂交扫描统计分析后得出位于染色体8P上 的与肝癌转移相关的基因。并用RT-PCR和Real。timePCR对筛选出的基因进行 了初步验证。 结果不同转移潜能的肝癌组织或细胞较正常肝组织或细胞均存 在差异表达的基因；当荧光强度设定为大于800的水平时，在80％的肝癌组织 的肝癌组织中明显下调的差异表达基因，并且在不同转移潜能的细胞系中进一步